T4 DNA聚合酶/T4 DNA Polymerase

英文名称：T4 DNA Polymerase
CAS号：9012-90-2
分子量：104kDa，单体

级别：BR
来源：含有T4噬菌体克隆基因43的大肠杆菌
浓度：5～10u/ul
活性定义：是指在37℃、30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量
酶活性分析混合物：67mM Tris-HCL（PH8.8）, 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM （NH4）2SO4, 0.2mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,dGTP, 0.4MBq/ML（3H）.-dTTP和0.2mM热变性和核酸酶处理的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分：20mM 磷酸钾（PH7.5）, 200mM KC1, 20mM DTT和50%（v/v）甘油
5×反应缓冲液：335mM Tris-HCL（PH8.8，25℃）, 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM （NH4）2SO4
抑制剂：金属螯合剂，核苷酸类似物2（p-n-butylanilino）-dATP、N2-（p-n-burylanilino）-dGTP、SH-封闭混合物
失活：75℃加热10分钟
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
性状：悬浮液。重组酶，在模板及引物存在的条件下，T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶还具有3'→5'外切核酸酶的活性，该活性比DNA聚合酶I强。T4 DNA聚合酶不像大肠杆菌DNA 聚合酶 I，不具有5'→3' 外切核酸酶的活性。
用途：生化研究。3'突出末端平滑化；5'突出末端补平；单链删除后亚克隆；基因定位突变中的第二条链的合成；通过置换合成法（replacement synthesis）对DNA探针进行标记。
保存：-20℃