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CCK-8试剂盒细胞活力检测细胞增殖或毒性

  • 品牌款式:Cell Counting Kit-8
  • 更新用时用时:2024-04-17

概括描写:规格:100T/500T/1000T/5000T 价格:40/220/350/950,产品简介
本CCK-8细胞活力检测试剂盒含有WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),在电子载体存在的情况下WST-8被细胞内脱氢酶氧化还原后生成水溶性的橙黄色甲臜染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。CCK-8法是用

产品详情
規格:100T/500T/1000T/5000T  价位:40/220/350/950,服务百度百科本CCK-8肿瘤受损生殖人体细胞膜凝集力测量生化试剂盒含有WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),在网络承载留存的问题下WST-8被肿瘤受损生殖人体细胞膜内脱氢酶被氧化恢复备份后制成水无水磷酸氢的米黄色的甲臜染色剂都可以溶解性在阻止激发基中,制成的甲臜量与活肿瘤受损生殖人体细胞膜个数正相关。CCK-8法是用作测定方法肿瘤受损生殖人体细胞膜增值或致癌性测试中活肿瘤受损生殖人体细胞膜金额的这种高快速度,无射线性的比色测量法,可替代品过去的MTT法。微生物培养基盒组份目录索引号 组   份 标准 保存必备条件CCK-8水溶液 1mL(100 assays) 4℃闭光,5年行之有效CCK-8盐溶液 5mL(500 assays) 4℃遮光,年合理有效CCK-8悬浊液 10mL(1000 assays) 4℃背光,半年很好CCK-8饱和溶液 30mL(3000 assays) 4℃背光,每年有郊CCK-8稀硫酸 50mL(5000 assays) 4℃闭光,5年很好的CCK-8稀硫酸 100mL(10000 assays) 4℃闭光,一年多更有效微生物培养基盒之内自购议器和微生物培养基中速抽滤机、酶标仪(450nm主波长)、uv摇床、少量移液器、96孔培育出板、CO2培育出箱基本操作过程之一

1. 通常细胞增殖实验每孔加入100ul (2000个细胞),细胞毒性实验每孔加入100ul(10000个细胞) (具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定)。将培养板在培养箱预培养24小时 (在37℃,5% CO2的条件下)。2. 按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激。3. 将培养板在培养箱继续培养一段适当的时间 (例如: 24小时或48小时)。4. 每孔加入10ul  CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,其它情况以此类推。可以用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测,需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。 (尽量不要在孔中生成气泡)5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。7. 如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10 μl 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。结果判断(1) 细胞的存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(**培养基加CCK-8,无细胞),各重复孔的OD值取均数±SD。                细胞的存活率以T/C%表示,T为加药细胞的OD值,C为对照细胞的OD值。                细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100            (2) 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)或T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

存有状况4℃背光,一年下来更好要注意细节1. 打疫苗时重视上皮内部悬液需求混匀,以尽量避免上皮内部积淀了,引起每孔中的上皮内部用户区间范围,可每打疫苗数孔即混匀两下。提升出板四周围逛一逛孔提升出基比较容易挥发性,为了让减轻计算误差,意见建立提升出板的四边每孔只加提升出基或灭菌PBS,而不于为指标值探测孔。2. CCK- 8的适宜反馈时光以到底显色的适宜时光准确。首要次做科学试验时,意见建立先做数孔探求打疫苗上皮内部的适宜用户和建立CCK-8化学化学药品后的适宜孵育时光。一样现状下,白上皮内部较难显色,因需求较长的CCK- 8反馈时光或加强上皮内部用户 (~104个上皮内部/孔)。悬停上皮内部与贴壁上皮内部较之较难显色。对悬停上皮内部,在建立CCK- 8孵育1- 4小時后,可先从提升出箱中掏出,判别染色法系数或用酶标仪测得考虑CCK- 8适宜孵育时光。若显色困难的,可将提升出板放回提升出箱,随时提升出数小時后再测得。对贴壁上皮内部,CCK- 8的孵育时光一样为1- 4小時,半数超过上皮内部在提升出301分钟时间两既可以人的眼睛洞察分析到比较突出的显色反馈,提升出2-4小時时间两探测****。3. 本化学化学药品盒的探测信任于脱氢酶离子液体的反馈,如待探测风险管理采集装修标准中现实有着较多的展现剂,譬如点人体抗氧化性物剂会骚扰探测,需采取行动弄掉。内含酚红的提升出基不后果本化学化学药品盒做上皮内部渗透性的测得。4. 要怎样确定待测饱和稀硫酸会不有展现性?包括上皮内部的待测饱和稀硫酸孔中建立CCK-8饱和稀硫酸10μl,孵育1-4小時,测得在450 nm处的没字吸光度。如该吸光度不大,原因分析待探测风险管理采集装修标准中现实有着较少的展现剂,官方探测时既可以简单建立CCK-8 ;如该吸光度对比较大的,原因分析待探测风险管理采集装修标准中现实有着较多的展现剂,官方探测时则需求祛除提升出基,混用提升出基洗條上皮内部几次,第三建立新的提升出基和10 μl CCK-8做探测。5. 如样品管理为高沉淀物度的上皮内部悬液,意见建立因素600 nm (或600 nm超过) 身为参比吸光度,减免参比吸光度的O.D值既可以。6. 请穿科学试验服并戴一起性防护手套基本操作。




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