Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒

规格为:20T/50T/100T,费用：400/700/120元，货品百科Annexin是类大面积遍布于真核肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系浆内钙铝离子依赖感的磷酯切合核蛋白，参与活动肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系内的数据信号转导。Annexin V利用性切合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，英文缩写PS)。磷酯酰丝氨酸主耍遍布在肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜內侧，即与肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系浆之间的那侧。在肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系的发生凋亡的早前，差异内型的肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系一定会把磷酯酰丝氨酸外拉到肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系外面，即肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜前侧。磷酯酰丝氨酸暴晒到肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系外面还会提高网站血凝功能和疾病发生反应迟钝。而Annexin V和外拉到肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系外面的磷酯酰丝氨酸切合后会抑制磷酯酰丝氨酸的促血凝功能和促疾病发生反应迟钝活性氧。这样Annexin V被做为探测肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系早前凋亡的准确度评价指标之首。用代有绿化荧光的荧光电极FITC标注的Annexin V，即Annexin V-FITC，就会用普鲁士蓝印染細胞肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系仪或荧光显微镜无比比较简单而直接的地探测到磷酯酰丝氨酸的外翻这肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系凋亡的重点特殊性。       Annexin V-FITC肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系凋亡探测化学制剂盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC标注的重新组合人Annexin V来探测肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系凋亡时发现在肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜外面的磷酯酰丝氨酸的的肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系凋亡探测化学制剂盒。会利用普鲁士蓝印染細胞肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系仪、荧光显微镜或多种荧光探测机对其进行探测。      本化学制剂盒还能提供了碘化丙啶印染液，碘化丙啶会印染萎缩肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系或凋亡中晚期退化肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜系统性的肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系，形成红荧光。就萎缩肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系，犹豫肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜的系统性开始退化，Annexin V-FITC会进行到肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系浆内，与出于肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系膜內侧的磷酯酰丝氨酸切合，然而也使萎缩肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系形成绿化荧光。这样将Annexin V与PI配备利用，就会将出于差异凋亡时间的肿瘤受损肿瘤人体神经人体体组织細胞膜核核系界定成功。免疫试剂盒组份 20 assays  50 assays 100 assaysAnnexin V-FITC 100μL 250μL 500μL 4℃阴凉配合液 15 mL 40 mL 75 mL 4℃碘化丙啶 （PI） 100μL 250μL 500μL 4℃闭光采血管盒本身配备测试仪器和采血管免疫印迹受损细胞仪或荧光显微镜、减速离心式式机、移液器、1.5m L离心式式管、载玻片、盖玻片、PBS、包含EDTA的胰酶消化不良液工作步驟1、对待漂浮癌細胞：A、在参与完癌細胞凋亡激刺后，1000g (约1000-2000rpm) 抽滤力式式力式分之五钟，弃上清，收录癌細胞，用PBS轻高低悬癌細胞并记数器。（小心：PBS重悬不能少略，PBS重悬的阶段同一也更好地发挥了洗衣机清洗癌細胞的帮助，都能能做到未果Annexin V-FITC的根据。）B、取1~5×105重悬的癌細胞，1000g抽滤力式式力式分之五钟，弃上清，小心要把PBS榨干净，（选做环节：下载到250ul的根据液轻高低悬癌細胞，1000g抽滤力式式力式分之五钟，弃上清）下载到500µl 根据液轻高低悬癌細胞。        C、下载到5µl Annexin V-FITC，莞然混匀；再下载到5 μL 碘化丙啶，莞然混匀。        D、常温(20-25℃)闭光孵育10一分种的英文。都能能在安全使用铝铂参与闭光。E、逐渐参与免疫印迹的癌細胞仪查重，Annexin V-FITC为浅草浅绿色荧光，PI为橙灰色荧光。这样安全使用荧光显微镜下查重，滴几滴不错达到刺绣后的癌細胞悬液于载玻片上，合用盖玻片盖紧癌細胞时需查重。2、对待贴壁癌細胞：A、把癌細胞培植液吸出至一适于抽滤力式式力式管道，PBS洗衣机清洗贴壁癌細胞一天，用胰酶癌細胞代谢系统不好液(最佳不用了所含EDTA)代谢系统不好癌細胞。（注：胰酶代谢系统不好时候很不易于过久，不可能易于使得假阳型）B、癌細胞代谢系统不好来后，下载到环节2A中收录的癌細胞培植液，稍混匀，变更到抽滤力式式力式管道，1000g抽滤力式式力式分之五钟，弃上清，收录癌細胞，用PBS轻高低悬癌細胞并记数器。。C、取1~5×105重悬的癌細胞，1000g抽滤力式式力式分之五钟，弃上清，小心要把PBS榨干净，（选做环节：下载到250ul的根据液轻高低悬癌細胞，1000g抽滤力式式力式分之五钟，弃上清）下载到500µl根据液轻高低悬癌細胞。        D、下载到5µl Annexin V-FITC，莞然混匀；再下载到5 μL 碘化丙啶，莞然混匀。      E、常温(20-25℃)闭光孵育10一分种的英文。都能能在安全使用铝铂参与闭光。F、逐渐参与免疫印迹的癌細胞仪查重，Annexin V-FITC为浅草浅绿色荧光，PI为橙灰色荧光。这样安全使用荧光显微镜下查重，滴几滴不错达到刺绣后的癌細胞悬液于载玻片上，合用盖玻片盖紧癌細胞时需查重。3、对待贴壁癌細胞的原位荧光显微镜查重：注：本方案的显著优点是都能能原位关察癌細胞凋亡，短处是区域凋亡根据不贴壁而查重没有。A、(选做)这样條件经营许可证，把癌細胞培植于24孔板、48孔板或96孔板内；或将癌細胞于盖玻片上植物的生长，用尽量的凋亡介导剂介导癌細胞凋亡，并设立公司弱阳性较组。B、吸除癌細胞培植液，下载到PBS洗衣机清洗两三次；或将盖玻片用PBS洗衣机清洗两三次。（选做环节：用250ul的根据液洗衣机清洗盖玻片很多遍）        C、在500μL 的根据液中下载到5μL Annexin V-FITC， 5 μL碘化丙啶，莞然混匀。        D、将不错达到液体中加入适量于培植板孔中，或中加入适量于盖玻片表明层，使长有癌細胞的盖玻片表明层不均涉及。        E、常温(20-25℃)闭光孵育10一分种的英文，逐渐在荧光显微镜下关察，Annexin V-FITC为浅草浅绿色荧光，PI为橙灰色荧光。保留因素4℃保留，Annexin V-FITC和碘化丙啶脱色液需阴凉保留，两年很好。为长时间保留，能够把Annexin V-FITC和碘化丙啶脱色液应适当散装后-20℃保留，搭配液能够直接的-20℃保留。要留意情况说明1、但如果有疾病或细菌水污染，会严重性决定检查视觉效果。2、染料后宜立刻检查，时刻长点机会会出现凋亡或病变癌細胞的用量统计曾加。还荧光化学物质均易有生淬灭，在实行荧光观查时，一定要还缩短观查时刻，还在运营和停放方式中也一定要需要注意闭光保管。3、但如果检查时Annexin V-FITC的荧光较弱，最好是用250ul的紧密依照液轻重轻悬洗衣癌細胞，避开残存的聚磷酸盐溶剂，还也可缩小许多紧密依照液的大小（这种200ul的大小）来增长Annexin V-FITC的工作任务溶度。4、以便您的人身安全和稳定，请穿实验英文服并戴次性劳保手套运营。5、本实验试剂盒符合于检查活癌細胞，流式的人体癌肿瘤细胞血細胞癌細胞仪检查时，癌細胞用量统计以求应底于1×105，，不符合于检查组织化样品6、因检查癌細胞的款式、凋亡诱骗型剂类别、在的操作的检查器材与众不同，因其流式的人体癌肿瘤细胞血細胞检查的荧光赔赏费也与众不同，以至于最好是每一次的检查均需在的操作未经授权许可凋亡诱骗型处置的癌細胞作比对，实行荧光赔赏费的可以调试。7、用流式的人体癌肿瘤细胞血細胞癌細胞仪检查，调动起主吸光度Ex=488 nm; 发射点主吸光度Em=530 nm。Annexin V-FITC的生态荧光根据FITC出入口（FL1）检查；PI黑色荧光根据PI出入口（FL2或FL3）检查，最好是在的操作FL3。荧光赔赏费可以调试：在的操作未经授权许可凋亡诱骗型处置的没问题癌細胞，作比对实行荧光赔赏费可以调试避开光谱仪交叠和场景人物风格的设定在十字门的选址。