细菌氢ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒说明书

细菌氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒
产品说明书

通常借款用途YIJI螨虫病毒氢ATP酶（H＋-ATPase）化学活化酶重复反映迟钝光谱分析分析法律规定的量检查制剂是一种种目的在于在使用氢ATP酶、异丙醇酸激酶和乳酸脱氢酶重复反复法反映迟钝控制系统，在确诊别的ATP酶干涉的状况下，受氢ATP酶的电离会产生的ADP环节中，引起的替换型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的空气钝化反映迟钝， 即采取光谱分析分析法测定方法步骤其空气钝化后吸光谷值（NADH密度）的发生变化，因此做好推算出方酶化学活化的而精品的技術方法步骤。该技術根据匠心研制开发、非常成功实验所证实的。其是和于各式各样螨虫病毒细胞核H＋-ATP酶的特女性朋友化学活化检查。企业产品不标危害性血清酶，非常严格无菌运作，即到即用，运作简便易行，性能方面安全稳定，反映迟钝seo，检查脆弱。的技术情况氢ATP酶（H＋-ATPase；EC3.6.3.14），称作为质子或氢铁阳离子转位ATP酶（Proton-Translocating ATPases），在生态学人体脂肪减压反射工作中起侧重于要效应。其拆分四类：质膜型（plasma membrane type）、真细茵型（eubacterial type）和囊泡型（vacuolar type）。质膜型会有于草木、酵母粉和胃液排泌型囊泡的质膜上，约100kd球蛋白酶；真细茵型会有于叶绿体、线粒体和细茵上，由疏水的膜环节和亲水的促使环节组建；囊泡型会有于真核生态学组织血細胞膜器的囊泡装置。氢ATP酶促使三磷酸腺苷化解为二磷酸腺苷和有机磷。这去玩磷过酸反响控制出人体脂肪，为组织血細胞膜灵魂新陈代谢的生材料能。另外用组织血細胞膜内ATP控制的人体脂肪反向跨质膜把质子运送出组织血細胞膜，制造并控制组织血細胞膜膜二边H的电耐腐蚀系数，为一品类次级运送体和检修通道球蛋白酶对所有营养丰富材料及铁阳离子的跨质膜运送出具人体脂肪。细茵氢ATP酶的很至关重要重在的调节组织血細胞膜内pH含量，是细茵组织血細胞膜长期生存和存活期的必备生活条件。为ATP，在是排除以外的别的，包扩钙（EGTA除理）、钠钾（乌本苷；ouabain除理）等ATP酶的抑制下，备受氢ATP酶的电离，因此利用甲苯酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）反响装置中，备份型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）图片转换为氧化的型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其谷值的变（340nm），来一定量讲解氢ATP酶的特异活性氧。其反响装置为：

产品内容

YIJI裂解液（Reagent A）                                   毫升    
YIJI保存液（Reagent B）                                     毫升
YIJI缓冲液（Reagent C）                                  毫升
YIJI酶促液（Reagent D）                                   微升
YIJI反应液（Reagent E）                                   毫升
YIJI底物液（Reagent F）                                      毫升
YIJI阴性液（Reagent G）                                       毫升
产品说明书                                                    1份

保存图片玩法手机截图在－20℃墙上里，禁止反复性冻融；YIJI底物液（Reagent F），禁止光照强度，更好要确保6月玩家专用

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器
（微型）台式离心机：用于样品操作
恒温摇床：用于细菌培养
培养箱：用于反应孵育
比色皿：用于光谱分析的容器
分光光度仪：用于光谱分析

实验步骤
 
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；YIJI底物液（Reagent F）注意避光。然后进行下列操作。
 
一、样品准备

1．准备好10毫升待测的细菌放进37℃摇床孵育16小时，速度为220RPM
2．直至OD600＝0.4至0.8，即1至2 X 107细胞/毫升
3．置于冰槽里5分钟
4．放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为1000g
5．小心抽去上清液
6．加入xx微升YIJI裂解液（Reagent A），充分混匀
7．转移到预冷的1.5毫升离心管
8．强力涡旋震荡15秒
9．置于冰槽里30分钟，期间强力涡旋震荡15秒三次
10．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为300g（或1000RPM，例如eppendorf 5415）
11．小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
12．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
13．小心去掉上清液 
14．加入xx微升YIJI保存液（Reagent B），混匀
15．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用YIJI Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－YJ30030.1）
16．即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

二、测定法提前准备

1．准备好待测样品（例如纯化细菌细胞膜蛋白等），置于冰槽里 
2．设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长为340nm，间隔5分钟，读数7次（共30分钟），并置零
3．YIJI缓冲液（Reagent C）室温下均衡温度

三、后台相较比较分析

1．移取xx微升YIJI缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
3．加入xx微升YIJI反应液（Reagent E）
4．加入xx微升YIJI底物液（Reagent F）
5．放进37℃培养箱里静置3分钟
6．加入xx微升YIJI阴性液（Reagent G）
7．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
8．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：340波长读数0分钟 －340波长读数30分钟

四、打样定制活力性法测

1．移取xx微升YIJI缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
3．加入xx微升YIJI反应液（Reagent E）
4．加入xx微升YIJI底物液（Reagent F）
5．放进37℃培养箱里静置3分钟
6．加入50微升待测样品（注意：50微克膜蛋白；样品须溶解）
7．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
8．即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数：340波长读数0分钟 －340波长读数30分钟
 
五、计算样品活性
 

 注意力法定程序

1．本产品为21次操作，包括背景对照测定
2．操作时，须戴手套
3．系统操作过程中，背景测定只需1次
4．建议样品忌用磷酸缓冲溶液、钠盐、钾盐、镁盐、EDTA、EGTA等，可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等  
5．加入样品启动反应后3秒内即刻光谱测定
6．反应测定值由高到低变化；测定可以持续30分钟
7．测定值由高到低变化，即0分钟测定读数高于10分钟或30分钟测定读数，表明有酶活性
8．光谱测定后，比色皿须清洗*
9．建议待测样本膜蛋白浓度为50微克/50微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整（本公司提供YIJI Bradford蛋白质浓度定量试剂盒YJ30030.1）
10．样品特异活性是指排除其它，包括钙（EGTA处理）、钠钾（乌本苷；ouabain处理）等ATP酶的干扰后的氢ATP酶活性
11．氢ATP酶活性单位浓度定义：在37℃温度下，pH 7.5条件下，每分钟内能够氧化1微摩尔还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）所需的酶量作为一个活性单位
12．本公司提供系列ATP酶类分析技术产品 
 
质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定检测准确

采购产品信息单酚类化合物定货讯息

编号                    名称                                                规格        
YJ50244.3            YIJI细菌氢ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次        
YJ50244.3A            YIJI裂解液（Reagent A）                          100毫升
YJ50244.3B            YIJI保存液（Reagent B）                            50毫升
YJ50244.3C            YIJI缓冲液（Reagent C）                               100毫升
YJ50244.3D             YIJI酶促液（Reagent D）                                10毫升
YJ50244.3E             YIJI反应液（Reagent E）                                10毫升
YJ50244.3F             YIJI底物液（Reagent F）                                10毫升
YJ50244.3G            YIJI阴性液（Reagent G）                            10毫升
YJ30030.1            YIJI Bradford蛋白质浓度定量试剂盒                    200次

微生物培养基盒下单新信息

产品编号    名称    规格
YJ50244.1    动物细胞氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次
YJ50244.2    动物组织氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次
YJ50244.3    细菌氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次
YJ50244.4    酵母氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次
YJ50241.5    植物氢ATP酶（H＋－ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒    20次