活体细胞线粒体膜通道孔红色荧光（TMRM）检测

YIJI细胞核内空气氧化应激性化学活化氧超氧阴阴阳离子朱红色荧光测试生化试剂盒产品就使用指南（中文翻译版）

主耍妙用

YIJI细胞系内钝化应激状态渗透性氧超氧阴阳离子橙红色荧光校正免疫试剂都是种目的在于顺利通过透膜荧光染色剂剂二氢溴化乙啶，在肿瘤神经元氧化反应水平下，会产生颜色荧光，来加测肿瘤神经元内超氧阴铁离子活性酶氧族的转化和加入的而经典之作的系统性方式。该系统性经缜密制造技术、完成试验证明材料的。能够被应用在癌细胞凋亡、无线信号传达、哀老、代谢率和菅养学等的设计。品牌非常严格无菌检测，即到即用，使用简洁，活健康体检测，特性固定。

水平图片背景

超氧自由度基阴阳离子（superoxide radical；O2-）、过氧化反应氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟优质基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化反应基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧只有基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧只有基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴正离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌公民权基（semiquinone radical）、单线态空气（singlet oxygen）等体细胞膜内特异性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的会产生和大增，将引发体细胞膜肌肤衰老或凋亡。二氢溴化乙啶（Dihydroethidium bromide；Hydroethidine；DHE）是一个种*自由度确认体内部核，并在体内部内长年停留而不漏出的刺绣剂。迟早会被超氧自主基阴化合物氧化的，二氢溴化乙啶转变为溴化乙啶，开始细胞质核，与DNA紧密联系运用，便生成荧光。据图材料人体细胞内超氧阴亚铁离子活力氧族的现实存在。 

厂品内部

YIJI清除液（Reagent A）    毫升

YIJI脱色液（Reagent B）    微升

YIJI稀释液液（Reagent C）    毫升

YIJI保存图片液（Reagent D）    毫升

产品设备阐明书    1份

存为措施

保持YIJI固色液（Reagent B）在－20℃保鲜柜里，非常严格逃避阳光照射；剩余的导出在4℃洗衣机里；可以有效提高6月

普通用户自带

胰蛋清酶乙二胺四乙酸混和液（GMS12024）：用做細胞分离

*神经细胞膜塑造教育液（GMS12052）：使用于神经细胞膜操作步骤所需要的塑造教育基

15毫升扇形离心法管：在肿瘤细胞操作方法的容器设计

1.5毫升离心分离管：适用于生殖细胞上色的袋子

陪养箱：用以影响孵育

血细胞核系计算器仪：适用于细胞核系计算器

台式机离心分离机：用以供试品的操作

比色皿或96孔板：应用于荧光酶联免疫法解析的袋子

组织细胞膜流式的仪：应用在组织细胞膜荧光研究分析

（共焦点）荧光显微镜：应用在观察动物荧光细胞膜

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：使用受损细胞荧光降钙素原检测具体分析

实验设计步数

• 间接的法

测试開始前，将－20℃家用冰箱里的采血管盒中的YIJI着色液（Reagent B）复制图层冰槽里融入，YIJI摇匀液（Reagent C）放在37℃衡温水糟里提前预热。第二步退出xx微升YIJI刺绣液（Reagent B）到新的1.5毫升离心分离管，融入xx微升YIJI溶解稀释液（Reagent C），混匀后，符号为YIJI染色的的工作液，置于暗室里。然后呢通过列举操作步骤。

• 做准备1瓶25cm2体细胞系锻炼瓶的待测体细胞系
• 细心抽去细胞核培育液
• 引入xx毫升 YIJI彻底清除液（Reagent A）到人体细胞提升瓶，包裹提升瓶外壁
• 警惕抽去YIJI去除液（Reagent A）
• 引入1毫升移动用户配备的胰球蛋白酶乙二胺四乙酸交织液，填满一部分培養水平线
• 插入37℃致力于箱一分种
• 震动塑造培养瓶，使癌细胞掉发
• 申请加入4毫升观众自购的*受损细胞培育液
• 移入15毫升椎型离心分离管，彻底混匀（提前准备：透明桌面癌细胞随便从这个流程已经开始）
• 移取10微升在血神经细胞核数值仪安于现状行神经细胞核数值
• 移除1 X 106神经细胞到新的15毫升碗形离心分离管
• 装入台式机离心法式机离心法式五一分钟，极限速度为300g
• 心抽去上清液
• 建立xx毫升具有YIJI固色液（Reagent B）和YIJI扑灭液（Reagent C）的YIJI固色工作上液，柔美混匀
• 弄进37℃恒湿菜盆孵育20钟头，预防光线
• 加入台式电脑抽滤分离机抽滤分离4半小时，访问速度为300g
• 警惕抽去上清液
• 申请加入预冷的xx微升YIJI上传液（Reagent D），轻缓混匀細胞颗粒剂群
• 放进去冰槽里
• 使用下面方式方法中的一个开展操控：
  • 即时做细胞膜流式细胞仪深入分析：藻红蛋清（phycoerythrin；PE）光波，分析50000个组织上面――

波峰右移，证实超氧阴化合物含锌量高

• 或运行（共焦点）荧光显微镜关注（明确检查测量）：

1）移取10微升上面的受损细胞悬液到载波片上，盖紧盖玻片

2）调动光主波长540nm，散热光主波长590nm――

大红色荧光减弱，表述超氧阴正离子含氧量高

• 或选用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检验（酶联免疫法检验）：

1）移取400微升可以达到受损细胞悬液到1毫升比色皿

2）参加xx微升YIJI留存液（Reagent D）

3）左右偷倒混匀多次

4）装进荧光分光光度仪：培养可见光激发光谱540nm，散掉可见光激发光谱590nm――

RFU增强，阐明超氧阴阳离子的含量高

• 马上法

调查开使前，将－20℃冰柜里的化学试剂盒中的YIJI染色法液（Reagent B）放入冰槽里冰化，YIJI就稀释液（Reagent C）倒入37℃恒温性比较好洗菜盆里加温。而后移出来xx微升YIJI脱色液（Reagent B）到新的1.5毫升离心分离管，填加xx微升YIJI调制液（Reagent C），混匀后，标识为YIJI上色岗位液，插入暗室里。随后采取下面进行。

1．筹备9个神经元激发24孔板的待测神经元，神经元占满率达70％

（特别留意：是可以用载玻片，载玻片的塑造教育皿，35mm的塑造教育皿，和其余的塑造教育孔板，见注重地方5）

2．留神抽去上皮细胞训练液

3．小心翼翼沿圆孔壁放入xx微升具有刺激性YIJI染色法液（Reagent B）和YIJI直接稀释就可以液（Reagent C）的

YIJI印染工作中液到1个大概内部提升出来孔，包含提升出来孔界面

4．放入37℃细胞膜培養箱里孵育2015分钟

5．注意抽去有效YIJI染色法运转液 

6．注意两条路孔壁放入xx微升37℃暖机的YIJI储存液（Reagent D）到细胞核塑造孔

7．抉择列举的方式一种实施进行：

（A）操作上下颠倒荧光显微镜查看（相关性测量）：

发挥主光波长540nm，释放出来主光波长590nm――紫色荧光提升，表示超氧阴铁离子浓度高

• 选择荧光分光光度仪或荧光酶标仪查测（降钙素原检侧查测）：

倒入荧光分光光度仪或荧光酶标仪：提升光的光的波长540nm，释放出光的光的波长590nm――RFU增加，揭示超氧阴阴阳离子含水量高

主意情况说明

• 本类产品为20次（1毫升管理体制）或40次（0.5毫升管理体制）的操作
• 的操作时，须戴胶手套
• 孵育时，逃避采光
• 本品牌适多种外形尺寸的激发人体细胞：载玻片，载玻片陪养皿，35mm陪养皿，和各种各样陪养孔板，须合理更改操作方法储电量：

• 依据肿瘤细胞性质，调控YIJI刺绣工作任务液适用分子量（1：200至1：1000容积比），尽量不要过分复染
• 意见建议受损细胞系染色剂实现后，马上开展受损细胞系荧光解析 
• 发挥光谱需要考虑在485至540nm彼此，散发出来光谱565至610nm彼此
• 本单位时保证系统超氧阴铝离子几丁质酶氧测试化学药品车辆

服务质量规范

• 本车辆经检测不稳性不稳
• 本物料经签别荧光明白