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YIJI 线粒体呼吸链复合物 V 活性光谱法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)

更新时间:2014-03-26      浏览次数:1680

YIJI 线粒体呼气链包覆物 抗逆性光谱分析法定标准量测量化学制剂盒护肤品维修手册书(简体中文版)

主要配途

YIJI 线粒体吸链包覆物 V(F0F1-ATP 酶/ATP 制作而成酶)灵活性光谱仪法定假期量查重化学药品是一个种目的在于利用丙

酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续性配置法反应迟钝系统性,检测与 ATP 提炼对照的 ATP 油脂水解诞生 ADP 整个过程中,伴随着的

恢复型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)空气氧化后吸光阀值的缩减,即选择光谱仪法校正产品的样品中酶活性氧的

而经典英文的技艺最简单的方法。该技艺由名手级科学性家匠心制造技术、成功的 实验性证明书的。其适宜于多种纯化线粒体打样定制(动

物、人体内、酵母菌)及及生殖细胞或集体裂解悬液产品的样品的 F0F1-ATP 酶/ATP 合成图片酶的炎症因子朋友化学活化检查。适用于心

肌、正能量分泌、淀粉酶组学、病症解剖学学、运动神经病变等研究分析。新产品富含被污染的性淀粉酶酶,要严无菌室,即到即用,

实际操作简练,特性平衡,不起作用提升,检侧刺激性。

技术水平环境

线粒体正常呼吸链组合物V,常常称作ATP分解酶(ATP synthase) F型ATP酶 type ATPase)、(F和F1F0 ATP酶(F1F0

ATPase),是线粒体防氧化磷硝化作用的*的反应。其大分子量为500KD,内含第十五个亚机关单位,里面3个:ATP酶6

和8为线粒体DNA项目编码的。ATP酶最主要有一个节构域:F0为质子清算通道,由些膜淀粉酶制成,还有a、b、c、d、

e、F6、A6L、OSCP(oligomycin sensitive conferring protein)等;和F1催化反应活性酶类组成域,由水可溶的α3β

3γδε淀粉酶组成组成部分。其zui基本特征性的酶活力性是寡霉素强烈的ATP合并酶。包覆物V的重要用途就是存在大组成部分

神经细胞需用的消耗的能量ATP。ATP的结合还要线粒身体内部膜电子元器件传输到氧碳原子时,呼吸道链球蛋白主产生的质子等度变现。

质子能够 F0架构特征域产生到栽培基质,促活F1致使活性酶类架构特征域,致使ATP生成。该酶出错会会导致心肌和神经末梢系统软件

症状。依托于ATP,在寡霉素进行下,收到F1F0 ATP酶的溶解,因此经过甲苯酸激酶(pyruvate kinase;PK)

和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase;LDH)反應控制系统中,修复型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide

adenine dinucleotide;NADH)还原成为氧化物型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)

行成的吸光峰峰值的变现(340nm),来按量概述F1F0 ATP酶几丁质酶。其生理反应操作系统为:

货品信息内容

YIJI 储存液(Reagent A)

YIJI 反映液(Reagent B)

YIJI 阴性化液(Reagent C)

YIJI 底物液(Reagent D)

YIJI 专性液(Reagent E)

厂品解释书

毫升

毫升

毫升

微升

微升

1

留存方式英文

维持在-20℃洗衣机里,减少频繁冻融;YIJI 发生反应液(Reagent B),以免光照度,有效果保障 6 月

朋友专用

比色皿:在光谱分享分享的贮罐

1

 

分光光度仪:采用光谱介绍介绍

提升箱:适用孵育生理反应物

科学试验步聚

实验报告刚开始前,将-20℃墙上里的化学药品盒中的化学药品氢氧化钠溶液复制图层冰槽里熔化;YIJI 发应液(Reagent B)注

意阴凉。那么使用下述作业。

一、 核查预备

1. 做好准备好待测试样(举个例子纯化线粒体试样等),移至冰槽里(要目光:查重前可溶性高,溶于水的线粒体;参考要目光事由 4)

2. 调整好分光光度仪(工作温度为 30℃):主波长为 340nm,时间间隔 30 秒,读数 11 次(共 分钟的时间),并置零

二、 蓝本比检测

1. 移取 xx 微升 YIJI 缓冲器液(Reagent A)到新的比色皿

2. 加盟 xx 微升 YIJI 的反应液(Reagent B)

3. 参与 xx 微升 YIJI 底物液(Reagent D)

4. 放在 30℃养成箱里孵育 3 分鐘

5. 加如 xx 微升 YIJI 阴液(Reagent C)

6. 高低堆放多次,混匀(抽选在 秒范围内)

7. 立刻装进分光光度仪探测,此为历史背景空比较:340 光的波长读数 0 20分钟 -340 光的波长读数 分鐘或 15分钟

三、 仿品总亲水性测试

1. 移取 xx 微升 YIJI 缓冲器液(Reagent A)到新的比色皿

2. 添加 xx 微升 YIJI 表现液(Reagent B)

3. 申请加入 xx 微升 YIJI 底物液(Reagent D)

4. 插进 30℃塑造培养箱里孵育 3 分种

5. 建立 100 微升待测样机(小心:10 微克传输线粒体蛋清;图纸须降解;参看主要重大事项 4)

6. 两边迷倒无数次,混匀(规定在 秒时间内)

7. 立刻放入分光光度仪检则,此为印刷品总渗透性读数:340 光的波长读数 分钟左右 -340 光谱读数 半小时或 分鐘

四、 样件非特异渗透性校正

科学实验着手前,移取 100 微升待测产品的样品(考虑:10 微克数据总线粒体蛋清;仿品须析出;参加注重情况说明 4)到 1.5

毫升离心法管,放入 xx 微升 YIJI 专性液(Reagent E),混匀后,倒入 30℃培养出箱里孵育 15 20分钟。然

后摄于冰槽里自备

1. 移取 xx 微升 YIJI 保护液(Reagent A)到新的比色皿

2. 申请加入 xx 微升 YIJI 发生反应液(Reagent B)

3. 融入 xx 微升 YIJI 底物液(Reagent D)

4. 放至 30℃教育培养箱里孵育 3 几分钟

2

 

5. 填加 120 微升以上预整理的待测合格品

6. 上下左右倾倒垃圾四次,混匀(三倍在 秒里面)

7. 即可放到分光光度仪检验,此为样板非特异活性氧读数:340 光谱读数 0 半小时 -340 激发光谱读数 1 半小时或 5 半小时

五、 计算出仿品灵活性

1)原辅料吸附性(总吸附性和非特异吸附性)

【(合格品读数-背静读数)X 1(机制体积;毫升)X 仿品掺水3的倍数】÷【0xx(仿品发热量;毫升)Xxx(毫

摩尔吸光常数 X 1 或 5(作用时长,半小时)】=公司/毫升÷(样品管理核蛋白溶度)毫克/毫升=公司/毫克

计量单位=微摩尔 NADH/15分钟

2)原材料特异特异性

原辅料英文总可溶性检验-原辅料英文非特异可溶性检验=原辅料英文特异可溶性

关注事由

1. 本产品的为 21 次操作使用(10 个范本),以及 次后台比

2. 操作方法时,须戴乳胶手套

3. 程序操作步骤过程中 中,题材检验只需 

4. 线粒体仿品查重前,须容解;意见高周波治理(20 秒 X 3 重复;50%工作功率)或冻存溶解(-70℃至 37℃)

循环往复 次或动用 YIJI 线粒体溶解出来制剂盒-GMS10018

5. 小编建议线粒体悬液操作 0.25 M SUCROSE 和 2 mM EDTA,pH9.0;忌服磷酸降低饱和溶液

6. 改进措施动用线粒体裂解悬液,而而不是组织细胞系裂解悬液。假设动用组织细胞系裂解悬液,*须公开道歉;其次须加 50

微克

7. 融入检样后 秒内即时光谱图检测法

8. 的反应 钟头后光谱分析检测值趋向安稳;检测值由高到低发生改变;检测可不可以坚持 

9. 测试值由高到低变化无常,即 多分钟旋光度的测定读数超过 7分钟或 半个小时法测读数,阐明有酶灵活性

10.光谱仪检测法后,比色皿须除污*

11.觉得待测模本线粒体球蛋白含量为 10 微克/100 微升;这样模本酶抗逆性过低或过高,则不错增高或有效降低样

本量;重视运算表达式的优化(本单位作为 YIJI 线粒体溶解出来免疫试剂盒 GMS10018 为后期的线粒体蛋

白氧浓度检测法的预处置微生物培养基盒和 YIJI Bradford 淀粉酶质氧浓度一定量制剂盒 GMS30030.1)

12.原辅料特异亲水性通常是指寡霉素明感的 ATP 转化成酶,我们要除其他的骚扰重要因素(假如复合型物 I/II/III/IV 等)

13.线粒体透气链黏结物 V 酶渗透性企业密度定意:在 30℃温暖下,pH 7.5 的条件下,每一分钟的英文内会硫化 

摩尔修复型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所用的酶量做为一家几丁质酶标准

14.本集团可以提供系列的线粒体试述酶类方法企业产品

质理标准规定

1. 本货品经签别耐磨性比较稳定

2. 本好产品经技术鉴定检查合理

3

  
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