J9九游中国/ news

您的位置:首页  -  J9九游中国  -  免疫性金细胞膜化学上的工艺

免疫金细胞化学方法

更新时间:2011-07-29      浏览次数:1969

Geoghegan等于1978年应用免疫金探针检测B淋巴细胞表面抗原建立了免疫金法(1GS)。IGS的特点是染色程序简便,不需要显色,既能检测细胞表面的抗原,又能检测细胞内抗原。
下面以人肝组织HBsAg的定位检测为例说明间接免疫金法的步骤。
(1)石蜡切片一脱蜡复水至PBS。
(2)0.1%胰蛋白酶消化切片10rain或3mol/L尿素消化30rain。
(3)用蒸馏水振洗5minX2。
(4)用0.02mol/L TBS(pH8:2)振洗10rainX2。
(5)1%卵蛋白(EA)封闭10min。
(6)稀释鼠抗HBsAg单克隆抗体[用0.02mol/1 TBS(pH8.2),作1:100稀释],4℃环境下过夜。
(7)0.02mol/L TBS(pH8.2)振洗10rainX2。
(8)1%EA封闭10min。
(9)0.02mol/L TBS(pH8.2)稀释兔抗鼠金标抗体(1:8)37℃45min。
(10)0.02mol/I TBS(pH8.2)振洗10rainX2。
(11)蒸馏水振洗5minX2。
(12)1%戊二醛,作用10min。
(13)蒸馏水浸泡5min。
(14)用苏木素衬染核lmin,甘油封片。
结果:在光学显微镜下可见部分肝细胞浆内有金颗粒聚集呈红色,沿细胞膜分布,表明有HBsAg定位在细胞浆内

版权所有©2024 上海J9九游中国实业有限公司 All Rights Reserved      sitemap.xml技术水平支持软件: