组织IKKβ激酶活性光谱法定量检测试剂盒产品说明书

YIJI组织性IKKβ激酶抗逆性光谱分析发定量判断生化试剂盒好产品详细使用说明（中文名版）

主耍应用领域

YIJI企业IKKβ激酶活性酶类光谱分析法量监测采血管是一种种重要途径经过人工处理组成多肽底物，在IKKβ激酶过敏性减缓剂具有原因的情形下，感受到IKKβ磷过酸后，接着由异丙醇酸激酶和乳酸脱氢酶陆续无限循环法体现软件系统，核查行成ADP时候中，伴有的恢复原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的防氧化发应， 即用于光谱分析法校正其钝化后基线的变，以具体分析集体裂解合格品中IKKβ特异活性氧的而精品的新技术技巧。该技术过程缜密成就 研制、成就 研究发现的。其应采用各式阻止裂解浸取液合格品（家禽、人体细胞）、区域或*纯化酶合格品中IKKβ激酶的一定量查重，相应控药品和系统激活剂的选择。车辆非常严格没有细菌，即到即用，操控简单，耐腐蚀性稳定性，髙度脆弱。

高技术经验

B组织κ轻链多肽DNA促动子控药品激酶结合物（Inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells，kinase complex；IκB kinase；IKK；EC 2.7.11.10），是NF-κB卫星信号环路中的队员中的一个，由3个亚体购成：IKKα，又称作为IKK1或CHUK（conserved helix-loop-helix ubiquitous kinase）；IKKβ，又称作为IKK2或IKBKB；IKKγ，统称为NEMO或IKBKG。ITI1、GPRK2L、GPRK4，归于丝氨酸/苏氨酸激酶（serine/threonine protein kinase）父母中鸟苷酸通过核蛋白偶联蛋白激酶激酶（guanine nucleotide-binding protein-coupled receptor kinase；GRK）亚系全体成员中的一种。多什么是基因GRK亚系由6个全体成员造成，划分3类：也包括GRK1（网膜胡萝卜素激酶家系；rhodopsin kinase）、GRK2/3（β肾上腺素能感觉激酶；β-adrenergic receptor kinase）已经IKK/5/6（IKK激酶）。这当中G蛋白质偶联肾上腺素受体激酶4最好有4种进化体：IKKα、β、γ、δ，在睾丸进行中的高度体现。IKK使G淀粉酶偶联多巴胺受体，举例子多巴胺等去敏化（desensitization）、或是精子授精等密切相关。其总体目标蛋清为滋养的G-蛋清偶联核蛋白激酶蛋清，参与磷酸性反应后，减弱其技能。其用途越来越将导致基因遗传规律性或赢得高朝心律等患病。其磷酸性反应最终目标编码序列为RRREEEEESAAA。基本概念底物RRREEEEESAAA，在IKKβ激酶太敏主观促使剂5-苯基-3-脲啶噻吩-2-甲酰胺（(5-phenyl-3-ureido)-thiophene-2-carboxamide）长期存在前提的环境下，面临IKKβ激酶的磷硝化作用，赢得有机物磷硝化作用多肽，行而进行甲苯酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）不良反应系統中，重置型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转换为腐蚀型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光基线的变幻（340nm），来降钙素原检测了解IKKβ的特异可溶性。其反映的方式为：

物料东西

YIJI清理垃圾液（Reagent A）   毫升

YIJI裂解液（Reagent B）   毫升

YIJI缓存数据液（Reagent C）  毫升

YIJI酶促液（Reagent D）  微升

YIJI体现液（Reagent E）  微升

YIJI底物液（Reagent F）   微升

YIJI阴性反应液（Reagent G）  微升

YIJI专性液（Reagent H）  微升

设备维修手册书     1份

保留玩法

手机截图YIJI消除液（Reagent A）在4℃冰箱冷藏里；任何的存有在－20℃微波炉里，严苛尽量不要太阳光照和反复性冻融；有效率衡量6月

访客备用

IKKβ激酶：主要用于调节剂挑选

1.5毫升离心式管：在供试品手机截图的袋子

15毫升球形抽滤管：适用供试品治疗的储槽

（小形）台式一体机离心式机：中用组织结构预进行处理

比色皿或酶标板：代替光谱仪了解操控的场所

分光光度仪或酶标仪：用以打样定制光谱图深入分析

进行实验步骤之一

• 待测样机準備

• 微创拿掉节肢动物聚集，并秤重500毫克进行体积 
• （考虑步凑）放进去预冷的15毫升圆锥形离心力管
• （取舍方法流程）入驻xx毫升YIJI清理垃圾液（Reagent A）刷洗
• （选取具体步骤）抽去进行清洁液
• 移入到一名液氮冻存管
• 即时放至液氮罐隔夜
• 即日从液氮罐里取下，即可（zui迅速的度）用研磨抛光棒碾碎组识成金属粉状（特别留意：一定不要使进行冻融）
• 插进一15毫升球形离心分离管
• 加入到放入冰槽里的xx微升YIJI裂解液（Reagent B） 
• 超强涡旋式波动30秒，加以混匀
• 放入冰槽里孵育30min，这段时间内每10分超强力涡旋式自激振荡30秒（考虑：如需临时变慢，倒入－70℃冷柜里补充应急）
• 现在放至4℃台型离心法法机离心法法1015分钟，线速度为10000g 
• 小心留意移取上清液到新的无菌检测的1.5毫升抽滤管
• 移取10微升开展血清定量分析检测工具（需要注意：提案施用YIJI Bradford核核苷酸浓硫酸浓度降钙素原检测化学试剂盒－YJ30030.1）
• 放在－70℃的冰箱冷藏里保护或放至冰槽里备用电源

• 校正的准备
• 筹备 好待测样品管理（列举进行裂解悬液等），至于冰槽里 
• 选用好分光光度仪（热度为30℃）：可见光波长为340nm，隔1多分钟，读数6次（共5几分钟），并置零
• YIJI缓解液（Reagent C）在常温下平均气温
• 环境照表测试
• 移取xx微升YIJI抗震液（Reagent C）到新的比色皿
• 参与xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 下载xx微升YIJI现象液（Reagent E）
• 倒入xx微升YIJI底物液（Reagent F）
• 放入30℃训练箱里静置3分鐘
• 参与xx微升YIJI阴性化液（Reagent G）
• 上上下下倾到屡次，混匀（限制在3秒至少）
• 现在放进去分光光度仪检测工具，此为后台空比对：340可见光波长读数0min －340可见光波长读数530分钟
• 备样总渗透性校正
• 移取xx微升YIJI响应液（Reagent C）到新的比色皿
• 假如xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 成为xx微升YIJI作用液（Reagent E）
• 注入xx微升YIJI底物液（Reagent F）
• 放入30℃培养出来箱里静置3半小时
• 注入5微升待测打样定制（还要注意：50微克组织性裂解蛋白酶；样机须消融）
• 上堆放屡次，混匀（限定价格在3秒之外）
• 立马放到分光光度仪验测，此为样件总化学活化读数：340光谱读数0分 －340光谱读数5小时 
• 打样定制非特异渗透性旋光度的测定

测试逐渐开始前，移取xx微升YIJI储存液（Reagent C）到1.5毫升离心分离管，分为加入到xx微升YIJI专性液（Reagent H）和待测样板（需注意：50微克安排裂解蛋白酶），混匀后，倒入30℃的培养箱里孵育30分种。最后继读下例运作。

• 移取xx微升YIJI降低液（Reagent C）到新的比色皿
• 加进xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 进入xx微升YIJI化学反应液（Reagent E）
• 入驻xx微升YIJI底物液（Reagent F） 
• 放入30℃训练箱里静置3钟头
• 加如20微升所述预外理的待测供试品
• 上下两边坍塌次数，混匀（仅限在3秒左右）
• 立即放在分光光度仪检验，此为原材料非特异灵活性读数：340光波波长读数0分钟的时间 －340光谱读数5小时
• 确定产品的样品亲水性
• 备样总化学活化氧和非特异化学活化氧计算的

2）样品英文特异活力性核算

七、酶标板法测定

1）样品英文总化学活化测得

• 在96孔酶标板上提前做好应当符号：情况相较比较和原材料
• 分开移取xx微升YIJI储存液（Reagent C）到96孔板中
• 分别是填加xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 各自加盟xx微升YIJI想法液（Reagent E）
• 各用建立xx微升YIJI底物液（Reagent F）
• 悄悄摆动96孔酶标板
• 在30℃体温下孵育315分钟
• 各用倒入xx微升YIJI弱阳液（Reagent G）或待测样品英文（50微克组织结构裂解悬液球蛋白）到响应孔中（要注意：产品的样品须浑浊）
• 莞然晃荡酶标板
• 立马装进酶标仪加测：0半小时读数和5几分钟读数
• 化学活化算：
• 样品管理非特异特异性旋光度的测定

判断进行前，移取xx微升YIJI响应液（Reagent C）到1.5毫升离心力管，分别为申请加入xx微升YIJI专性液（Reagent H）和待测样机（注意力：50微克团体裂解血清），混匀后，放在30℃陪养箱里孵育3030分钟。以后再继续下类操作方法。

• 在96孔酶标板上干好合适标签：待测样板
• 移取xx微升YIJI缓解液（Reagent C）到96孔板中
• 注入xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 建立xx微升YIJI作用液（Reagent E）
• 引入xx微升YIJI底物液（Reagent F） 
• 莞然晃动96孔酶标板
• 在30℃气温下孵育3秒钟
• 进入20微升上面预外理的待测仿品
• 缓缓摇晃酶标板
• 立即放在酶标仪测试：0小时读数和5分鐘读数
• 活性酶类测算：
• 印刷品特异活力计算的

八、遏药制剂需求

• 在96孔酶标板上了解合理标出：背景图、*几丁质酶和待测缓和剂样品管理
• 按压表引入微生物培养基，确定图纸预正确处理

• 区别移取xx微升YIJI缓冲器液（Reagent C）到新的96孔板的所有孔里
• 不同添加xx微升YIJI酶促液（Reagent D）
• 分辨参与xx微升YIJI影响液（Reagent E）
• 各是加进xx微升YIJI底物液（Reagent F） 
• 轻柔的晃动酶标板
• 在30℃高温下孵育37分钟
• 建立20微升综上所述预进行处理的待测试样
• 即时插进30℃酶标仪验测：测读30一分钟
• 遏制可溶性确定：

需注意方式方法

• 本企业产品为25次操控，主要包括游戏背景操控
• 实际操作时，须戴胶手套
• 程序进行整个过程中，图片背景测量只需1次
• 供试品清理禁服磷酸降低盐溶液 
• 样板须回复函，至关核心 
• 加如试品启动时发应后3秒内立马光谱图法测
• 法测值由高到低发生变化；法测可不间断30一分钟
• 光谱仪测试后，比色皿须清晰*
• 样表检测法0半小时读数远远超出5几分钟读数揭示更具酶渗透性
• 推荐待测样板血清氨水浓度为50微克/5微升（本司给予 YIJI Bradford球脂肪酸浓度值按量化学药品盒－YJ30030.1） 
• 但如果待测样板溶液酸度过高或过低，就可以调正样板溶液酸度
• 可用到IKKβ可抑溶液剂对于可抑溶液剂剖析或阴剖析
• IKKβ活力工作单位酸度理解：在30℃摄氏度下，pH 7.5情况下，每一分钟内也能氧化物1微摩尔修复型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的需求的酶量算作两个活力计量单位
• 本集团提供了系列的蛋白质激酶检测工具微生物培养基品牌

高质量规格

本货品经司法鉴定能力稳固

本企业产品经签别加测敏锐

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