活体细胞线粒体损伤/氧化荧光测定试剂盒产品说明书

YIJI 活体細胞线粒体伤到/脱色荧光测定法采血管盒车辆详细使用手册（中文版版）

一般功能

YIJI 活体細胞线粒体磨损/腐蚀荧光测定法制剂是一种种重要途径能够 特女性朋友染色的剂分析一下线粒体膜心磷脂的变

化来界定或酶联免疫法测得线粒内含质理甚至随心所欲基、氧化反应物等对受损细胞线粒体的致毒与直接损伤意义的而经点

的工艺的方法。该工艺由名手级小学科中国科学家倾力制造技术、获得成功实验所证明怎么写的。行被用到组织凋亡、讯号交换、新陈代谢、

细胞代谢和膳食纤维学等的调查。品牌从紧无菌室，即到即用，进行简易化，活体检报告测，性能参数不稳定性。

技术设备情况

心磷脂（Cardiolipin）是线粒体膜上的重点物质之四。它对受损细胞硫化很大的敏感。线粒体脂类分解掉，促使心磷

脂更为明显限制，zui终从而造成线粒体的严重性有损。Nonyl-Acrydine Orange（NAO）是种可自由度采用细胞系膜的染

色剂，特喜欢的人地复染线粒体上的心磷脂，连接数出荧光。如若线粒体膜质以减少或面临影响相应被氧化的，其

荧光显著削弱。

产品的內容

YIJI 处理液（Reagent A）        毫升

YIJI 染色剂液（Reagent B）       微升

YIJI 配制液（Reagent C）        毫升

YIJI 另存液（Reagent D）        毫升

产品说明书                     1份

保存文档办法

同步保存 YIJI 脱色液（Reagent B）在－20℃电冰柜里，避免出现太阳光，另一个的存为在 4℃电冰柜里，有效的要确保6月

用户的自购

胰球蛋白酶乙二胺四乙酸相溶液（YJ12024）：用以神经元脱离了*细胞核养成液（YJ12052）：中用细胞系基本操作要求的养育基

15 毫升球形抽滤管：在細胞实操的储槽

1.5 毫升离心式管：用作受损细胞染料的溶器

血神经肿瘤细胞记数仪：使用神经肿瘤细胞记数

台式电脑抽滤机：主要用于发展上皮细胞

上皮上皮细胞流式的仪：广泛用于上皮上皮细胞荧光分享

比色皿：应用于上皮细胞荧光探讨的容器等

荧光显微镜：用以观测荧光神经元

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用以内部荧光降钙素原检测阐述

1

实验所步奏

一、 可以脱离或浮窗生殖细胞深入分析

实验性就开始前，将－20℃冰柜里的实验试剂盒中的 YIJI 固色液（Reagent B）嵌入冰槽里冰化，YIJI

做好稀释工作液（Reagent C）装入 37℃衡温水糟里暖机。并且移到 xx 微升 YIJI 复染液（Reagent B）到新

的 1.5 毫升离心分离管，加盟 xx 微升 YIJI 稀释液液（Reagent C），混匀后，将 YIJI 染色剂工作上液复制图层

暗室里。同一时间启闭荧光显微镜或荧光光度仪。以后实施以下操作方法。

1． 准备工作 1 瓶 25cm2血细胞膜培養瓶的待测血细胞膜（约 1 X 106细胞系）

2． 谨慎抽去细胞核教育培养液

3． 申请加入 xx 毫升 YIJI 进行清理液（Reagent A）到肿瘤细胞陪养瓶，包含陪养瓶外观

4． 警惕抽去 YIJI 处理液（Reagent A）

5． 参加 xx 毫升大家自带的胰血清酶乙二胺四乙酸混杂液，布满全部整个提升瓶从表面

6． 复制图层 37℃训练箱 1 分种

7． 电流声激发瓶，使神经元脱落情况

8． 入驻 4 毫升微信用户专用的*体细胞提升液

9． 移入到 15 毫升椎型离心式管，做好混匀（小心：悬浮物上皮细胞可能从相应操作步骤开使）

10．移取 10 微升在血内部核记数仪进取心行内部核记数

11．移出去 1 X 106组织到新的 15 毫升圆锥形离心法管

12．放到台式机离心分离法机离心分离法 5 30分钟，加速度为 300g

13．关注抽去上清液

14．申请加入 xx 毫升包含 YIJI 上色液（Reagent B）和 YIJI 稀释液液（Reagent C）的 YIJI 染

色运转液，温柔混匀

15．放到 37℃恒温器地漏孵育 20 秒钟，防止太阳光照

16．倒入台型离心分离法机离心分离法 5 几分钟，速度快为 300g

17．关注抽去上清液

18．下载预冷的 xx 微升 YIJI 存有液（Reagent D），柔美混匀组织细胞颗粒肥料群

19．放至冰槽里

20．现在实施细胞核流式细胞术仪了解（选用以下当中有一种）：

（A）吸光度 580nm（红光），分析 50000 个组织细胞这

波峰左移，体现了线粒体遭遇伤害或被氧化的，特异性氧族纯度高，脂类杂质可降解，线粒心肺功能重大大减少（线粒

体直接损伤或氧化的）

（B）光波波长 488nm（绿光），观察植物 50000 个生殖细胞以内

波峰左移或减轻，表示线粒体感受到损失或被空气氧化，灵活性氧族纯度高，脂类杂质光降解，线粒身体体质重减轻

（线粒体挤压伤或氧化反应）

21．或采用荧光显微镜了解（确定测量）：

1） 退出 50 微升在载玻片上

2） 立马实现载玻片压片（考虑下列关于中仅一种生活）

（A）增加光的波长 580nm，散发出主波长 630nm

红光下降，呈现几丁质酶氧族占比高，脂类产物分解，线粒体质虚寒重大幅度降低（线粒体影响或脱色）

（B）增加主波长 495nm，散出吸光度 519nm

绿光减低或减少，认为活性氧氧族占比高，脂类产品溶解，线粒身体体质重减少（线粒体神经损伤或硫化）

22．或实用荧光分光光度仪

2

1） 移取 xx 微升复染后的人体细胞供试品到消费者自带的 1 毫升比色皿

2） 引入 xx 微升 YIJI 保管液（Reagent D）

3） 内外私倒混匀

4） 现在放在荧光分光光度仪测读：滤波器激活光波波长 580nm，散出光的吸光度 630nm或滤波器调动光的吸光度 495nm，

散发出来主波长 519nm：可溶性氧族含铁高，脂类化合物化学降解，线粒基因重减小（线粒体神经损伤或空气氧化）――相对的

荧光公司的（RFU）大大减少

二、贴壁神经元定量分折（荧光酶标仪法量定量分折）

工作已经开始前，将－20℃洗衣机里的制剂盒中的 YIJI 染色法液（Reagent B）在室内温度下熔化，YIJI 稀

释液（Reagent C）放至 37℃恒温性比较好不锈钢水槽里加温。第三踢出 xx 毫升 YIJI 掺水液（Reagent C）到新的

15 毫升扇形离心力管，填加 xx 微升 YIJI 染色的液（Reagent B），混匀后，在制冷下静置，并标签为

YIJI 染料办公液，摆到暗室里。同样进入设置荧光显微镜或荧光酶标仪。但是参与下面进行。

1． 从血细胞培养出箱里取掉待测的 96 孔细胞核教育培养板

2． 仔细抽去每孔中的训练液

3． 留神添加 xx 微升 YIJI 清掉液（Reagent A）到 96 孔板中每个人个孔里

4． 仔细抽去每孔中的 YIJI 深度清理液（Reagent A）（考虑：切实保障训练孔中无一切液态残余）

5． 注意加如 xx 微升有 YIJI 复染液（Reagent B） YIJI直接稀释就可以液和（Reagent C） YIJI的

固色工作中液到 96 孔板中每项个孔里

6． 装入 37℃培植箱里，孵育 20 30分钟

7． 小心一点抽去每孔中的 YIJI 上色作业液（注意力：有效确保养成孔中无不管什么介质液体残余）

8． 当心填加 xx 微升 YIJI 清洁液（Reagent A）到 96 孔板中每项个孔里

9． 倒入荧光酶标仪测读：滤波器激起光波波长 580nm，散发出来可见光波长 630nm，忽闪三次 10，隔时候 0.5 秒

或滤波器激起光的波长 495nm，散发出激发光谱 519nm，忽明忽暗时候 10，区间时候 0.5 秒：渗透性氧族含铁高，脂类

物质降解塑料，线粒体型重削减（线粒体伤到或氧化的）――相对于荧光基层单位（RFU）削减

三、切成片脱色分折

实验所进行前，将－20℃电冰箱里的化学试剂盒中的 YIJI 刺绣液（Reagent B）嵌入冰槽里融解，YIJI

就稀释液（Reagent C）装入 37℃恒湿清洗机水槽中里点火。随后退出 xx 微升 YIJI 印染液（Reagent B）到新

的 1.5 毫升离心分离管，注入 xx 微升 YIJI 希释液（Reagent C），混匀后，将 YIJI 着色本职工作液放入

暗室里。时启动荧光显微镜。再使用下列不属于操控。

1． 提前准备 1 个待测的切块打样定制

2． 仔细加 xx 微升 YIJI 消除液（Reagent A），包含切块接触面

3． 留意移去切开上的 YIJI 请理液（Reagent A）

4． 细心配合 xx 微升有效 YIJI 脱色液（Reagent B） YIJI 就稀释液和（Reagent C） YIJI的

刺绣工作任务液，包含切开界面

5． 放进去 37℃组织训练箱里孵育 20 15分钟

6． 小心一点移去薄片上的印染液

7． 安全教案小班而且 xx 微升清新的 YIJI 整理液（Reagent A）

8． 小心翼翼移去 YIJI 清洗液（Reagent A）

9． 盖紧盖玻片

3

10．即可在荧光显微镜下进行了解：（使用下例这之中一款）

（A）激励吸光度 580nm，散出主波长 630nm

红光变弱，表面渗透性氧族水分含量高，脂类物资吸附，线粒体型重拉低（线粒体伤害或氧化的）

（B）激发起主波长 495nm，散发出来吸光度 519nm

绿光减低或缩减，体现了渗透性氧族含量的高，脂类成分生物降解，线粒基因重缩减（线粒体直接损伤或硫化）

考虑问题

1． 本产品设备为 400 次（4 个 96 孔板）、200 次（200 个组织切片）或 20 次进行（1 毫升正确处理液）

2． 各种控制均须灭菌的情况下展开

3． 操作流程时，须戴皮手套

4． 染色法剂行独立进到组织

5． 孵育时，需要避开日照时间

6． 提醒组织人体细胞染色的完整后，即可来进行组织人体细胞流式细胞仪研究

7． 红光验测含有非特异聊天，而绿光验测线粒体质虚寒量变化

8． 細胞流式神经元仪定量分析細胞查测量不容许底于 10000 个

9． 若显示红光或绿光强化或右移，有可能显示染色剂与胞浆内脂类材质非特情人依照，之所以表明有差异 癌细胞

款式，懂得调整 YIJI 印染的事情液的应用用量（1：100 至 1：1000 存储容量比），预防过早印染的，电磁干扰检

测

10．本工厂作为全系列线粒体定性分析微生物培养基产品的

高质量规定

1． 本物料经监定效果安全稳定

2． 本商品经认定荧光流畅