细胞培养常用试剂有关问题总结

1.谷氨酰胺使用方法是什么？

答：谷氨酰胺在硫酸铜溶液中很不稳定的，故4℃下派置1周可转换50%，选择中用单独配比，置-20℃保鲜柜中维持，用前加进提升液中。

2.碳酸氢钠在室温条件存放是否稳定？

答：碳酸氢钠黑色纳米银氢氧化的钠溶液，或不无色单斜晶系明显凝结。总量2.159。无臭、味咸，可互溶水，微互溶工业乙醇。其水氢氧化的钠溶液因水解反应而呈微含碱，热膨胀易可工业制硝酸掉，在65℃超过在短时间可工业制硝酸掉，在270℃时*丢失二氧化的碳，在烘干废气中无转变 ，在湿润废气中极慢可工业制硝酸掉。

3.培养细胞生长减慢的原因有哪些？其解决办法有哪些？

答：将得根本诱因有：变更了各个的塑造液或血清；塑造液中那些癌生殖细胞生長都要营养含量如谷氨酰胺或生長分子等损耗的或短缺或已被毁损；塑造物中含小量微生物或白色念珠菌被污染；化学药品保护不妥当；会相当新塑造液与原塑造液营养含量，会相当新血清与旧血清认可癌生殖细胞生長工作寻找将的根本诱因。 

缓解法：不断增加开始和结束教育训练体生殖细胞渗透压；让体生殖细胞渐渐的适宜新教育训练液；换入鲜活标定教育训练液；补加谷氨酰胺或滋生细胞因子等；用无消炎药教育训练液教育训练，如知道污染源，放弃教育训练物，或用消炎药除菌；血清需储存在-5℃到-20℃；教育训练液必须要在2－8℃阴凉储存；含血清*教育训练液在2-8℃储存，并在2 周间用完；分离处理教育训练物，的检测支原体。

4.L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？

答：L-谷氨酰胺在生殖组织受损细胞塑造出来时极其主要的。脱下来氨基后，L-谷氨酰胺用做为塑造出来生殖组织受损细胞的电能收入、体验血清质的镶嵌和核酸基础代谢。L-谷氨酰胺在稀硫酸中由三段日子完之后溶解，溶解率随保留体温而变。L-谷氨酰胺的溶解会造成氨的达成，而氨来说某些生殖组织受损细胞存在毒副作用。

5.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？

答：不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。通常使用的消化液浓度为： 
     （1）0.05％胰蛋白酶＋0.02％EDTA； 
     （2）0.25% 胰蛋白酶 
     多数细胞传代消化可使用0.25％胰蛋白酶＋0.02％EDTA这种消化液。

6.二价离子抑制胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？

答：二价阳化合物这些抑止性胰蛋清酶催化活性氧。EDTA代替螯合游化合物的镁阳化合物和钙阳化合物，是为了坚持抑止性胰蛋清酶的催化活性氧。最好是胰蛋清酶解决内部前，用EDTA刷洗内部，以除掉产自养成基相应有的二价阳化合物。

7.GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？

答：GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是另外一种个L-谷氨酰胺的产生物，其不相对稳定性高的alpha-氨基用L-丙氨酸来爱护。另外一种肽酶慢慢裂解二肽，增加L-谷氨酰胺供充分利用。GlutaMAX-I二肽特别相对稳定性高，是在121磅灭菌处理二十分钟的时间，GlutaMAX-I 二肽水溶液有小的可分解，但如果在同一生活条件下，L-谷氨酰胺基本上*可分解。