兔睾酮（T）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

兔睾酮（T）一定量测量化学试剂盒（ELISA）

用阐述书

【兔睾酮（T）Elisa免疫化学试剂盒免疫化学试剂盒称呼】

兔睾酮（T）按量监测化学制剂盒（ELISA）

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒试剂盒妙用】

参考值论文检测兔血清、血浆及有关的气体样品中睾酮（T）的含氧量。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒检测关键技术】

本微生物培养基盒适用双表面抗原二步夹心酶联免疫细胞离心分离法（ELISA）。将的标准品、待测样本量放入到二次包被兔睾酮（T）单克隆抗原黑色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，多加入酶标业务液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过被氧化物质酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的功用下变身黑色，颜色的深浅与样品中兔睾酮（T）浓度呈正各种相关，450nm激发光谱下核查OD值，跟据细则品和产品的样品的OD值，估算样板中兔睾酮（T）含量。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒试剂盒包含】

备注名称：细则品（1号→6号）质量浓度先后为：320、160、80、40、20、10ng/L.

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒须要而未具备的微生物培养基和电子元器件】

1、37℃恒溫箱

2、标淮的规格酶标仪

3、精密仪器移液器及一天性吸头

4、水蒸气蒸溜水

5、一遍性试管

6、吸附纸

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒操作步骤】

1、准备工作：从冷库去除生化试剂盒，在常温复温平稳30分钟的英文。

2、配液：用分馏水将20倍萃取洗衣机清洗液溶解成原倍的洗衣机清洗液。

3、加要求品和待测样例：取充裕次数的酶标包被板，一定于三层架构上，区分设备细则品孔、待测样板孔和空白的较孔，记录好各孔具体位置，在细则品孔里添加入细则品50μL；待测样版孔中先添加待测样版10μL，多加模板稀释液液40μL（即样品溶解稀释5倍）；空白页比孔不带。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液态物质，吸湿紙上拍干，每孔完成洗衣液，静置1min，甩去洗洁液，容易吸水从纸拍干，这样一来反复重复洗板4次（也常用洗板机按讲解书实际操作洗板）。

6、加酶标工做液：每孔填加酶标工做液50μL，空缺照表孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质，吸湿纸里拍干，每孔加注洗衣机清洗液，静置1min，甩去干洗液，吸潮A4纸拍干，这样的多次洗板4次（也可以洗板机按讲解书控制洗板）。

9、显色：每孔先引入显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，平板电脑苹果混匀器混匀30s（或手摸猛地振动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、解除：取出来酶标板，每孔加撤消液50μL，终结的反应（外表颜色由海蓝立转金色）。

11、检验：以留白孔调零，在停止后15分内，用450nm光波波长自动测量各孔的吸光值（OD值）。

12、计算方法：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒样本要求】

1、子样本不能含叠氮钠（NaN₃），会因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、生物标本数据采集后提前采取获取，获取按相关的文献资料采取，获取后应负快采取实验设计。若没办法当即试验报告，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒注意事项】

1、调查严谨遵照阐述书的操作步骤做出，调查结杲区分一定以酶标仪读数时以。

2、酶标包被板打开后如未用完，应即时存入封严袋里加皮肤干燥剂保留。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、记住范例早已经摇匀5倍，计算导致乖以5才行模本实际情况渗透压。

5、本采血管盒参考值条件为10-320ng/L，高于此区域，为规则身材曲线扩展确定所得税率，不为你的精确性性降钙素原检测导致，请你特殊化兑水液兑水后测定方法精确性性导致（10-320ng/L条件内），×总希释因数当以模本zui终氧浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为规避对称影响，标准单位品、样板和乱码照表每加个就是换第一次吸头；酶标工做液、样例摇匀液和底物等公共性混合物，要悬臂加样，不了遇上微孔过滤；不恰相同选择封板膜。

8、化学药品盒质保期内使用的，有所不同批号的化学药品没法混用。

9、底物B对光灵敏，减少长时光露出于光下。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒操作程序总结】

工作制剂，试品和规定品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒加测范围之内】

10ng/L – 320ng/L

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【兔睾酮（T）Elisa试剂盒有效期】

6月