兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

兔高变迁率族蛋白酶B1（HMGB-1）一定量判断生化试剂盒（ELISA）

操作阐明书

【兔高移迁率族蛋白质B1（HMGB-1）Elisa实验微生物培养基盒实验微生物培养基盒明称】

兔高转至率族球蛋白B1（HMGB-1）酶联免疫法检则免疫试剂盒（ELISA）

【兔高移动率族蛋清B1（HMGB-1）Elisa试剂盒试剂盒主要用途】

按量加测兔血清、血浆及对应药液样表中高变更率族球蛋白B1（HMGB-1）的分量。

【兔高转化率族淀粉酶B1（HMGB-1）Elisa试剂盒检测方法】

本微生物培养基盒通过双免疫系统抗体2步夹心酶联免疫系统吸附性法（ELISA）。将规范标准品、待测子样本申请加入到事先包被兔高挪动率族蛋白质B1（HMGB-1）单克隆抗体阳性半透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，另加入酶标岗位液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过脱色物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的做用下转变为紫色，颜色的深浅与样品中兔高变更率族淀粉酶B1（HMGB-1）浓度呈正涉及到，450nm光波波长下测得OD值，据准则品和图纸的OD值，算模本中兔高变更率族核蛋白B1（HMGB-1）含量的。

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒试剂盒根据】

自己的名字：原则品（1号→6号）浓度值循序为：16、8、4、2、1、0.5 μg/L

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒想要而未提高的实验试剂和仪器设备】

1、37℃衡温箱

2、标淮尺寸酶标仪

3、细密移液器及有期限吸头

4、水蒸气生理盐水

5、以此性试管

6、储水纸

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒操作步骤】

1、做好准备：从保鲜柜取掉生化试剂盒，室内温度复温失衡30分钟的时间。

2、配液：用分馏水将20倍高浓洗條液做好稀释工作成原倍的洗條液。

3、加标准的品和待测样品：取十分量的酶标包被板，紧固于三层架构上，分为如何设置规定品孔、待测样板孔和空缺對照孔，记下各孔地方，在规定品孔中放入规定品50μL；待测样板孔中先添加待测样板10μL，再加上样板就稀释液40μL（即模本希释5倍）；乱码對照孔不用。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去夜体，吸潮从纸拍干，每孔打满洗滌液，静置1min，甩去洗衣机清洗液，吸水性一张纸拍干，非常去重复洗板4次（也适用洗板机按这维修手册运行洗板）。

6、加酶标岗位液：每孔建立酶标岗位液50μL，空白一片剖析孔不带。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去固态，储水从纸拍干，每孔写满洗條液，静置1min，甩去洗衣液，吸水性一张纸拍干，越来越相似洗板4次（也快速可用洗板机按说书进行洗板）。

9、显色：每孔先入驻显色剂A 液50μL，加个入显色剂B液 50μL，小米平板电脑混匀器混匀30s（或手摸轻柔阻尼振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、撤消：拿出来酶标板，每孔加结束液50μL，中断发生反应（色彩由颜色立转浅黄色）。

11、校正：以白页孔调零，在停止后15钟头内，用450nm光的波长量测各孔的吸光值（OD值）。

12、计算出来：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒样本要求】

1、范例不能含叠氮钠（NaN₃），是因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本信息采集信息采集后提早采取导入，导入按相关联文献资料采取，导入后需承担快采取实验性。若不会即时试验装置，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒注意事项】

1、进行实验所可以依照严格可以依照就规格书的采取采取，进行实验所后果判别必须要以酶标仪读数准确。

2、酶标包被板开启后如未用完，应请马上装进抽真空袋内加干燥处理剂另存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、一定要记住样版都已经做好稀释工作5倍，运算导致×5才算得上是样品真实溶度。

5、本微生物培养基盒酶联免疫法区间为0.5-16μg/L，高达此范围内，为标准的身材曲线扩宽折算得到的，不充当较准酶联免疫法但是，若要非常规掺水液掺水后检测较准但是（0.5-16μg/L区域内），乘于总配制公因数仅以样版zui终溶液浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为解决相互弄脏，标准规范品、范本和空白图片比每加另一个也要进行更换做次吸头；酶标工作的液、范本调制液和底物等共同酚类化合物，要悬臂加样，不可碰上细孔；允许去重复运用封板膜。

8、生化化学试剂盒质保期内利用，各个批号的生化化学试剂不得当混用。

9、底物B对光强烈，解决长的时间表露于光下。

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒操作程序总结】

备好采血管，打样定制和条件品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒查重范围图】

0.5μg/L - 16μg/L

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【兔高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）Elisa试剂盒有效期】

6个月左右