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兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

更新时间：2011-08-08

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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

兔肉瘤死亡细胞因子α（TNF-α）按量测量生化试剂盒（ELISA）

运用产品说明书书

【兔癌症烂掉成分α（TNF-α）Elisa化学化学药品盒化学化学药品盒称谓】

兔良性肿瘤细胞坏死细胞α（TNF-α）按量监测生化试剂盒（ELISA）

【兔肉瘤萎缩细胞因子α（TNF-α）Elisa试剂盒试剂盒的用途】

定量分析检测工具兔血清、血浆及关于液态范本中良性肿瘤死亡因素α（TNF-α）的含量的。

【兔肉瘤细胞坏死要素α（TNF-α）Elisa试剂盒检测机制】

本生化试剂盒运用双表面抗原二步夹心酶联免役粘附法（ELISA）。将标品、待测模本成为到优先包被兔恶性肿瘤萎缩分子α（TNF-α）单克隆抵抗能力通透酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，加上入酶标岗位液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过阳极氧化物质酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的做用下成红色，颜色的深浅与样品中兔肉瘤挫裂要素α（TNF-α）浓度呈正对应，450nm吸光度下测定方法OD值，会根据条件品和仿品的OD值，折算子样本中兔淋巴肿瘤损伤系数α（TNF-α）份量。

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒试剂盒组成了】

1	酶标包被板	12孔×8条	7	显色剂A液	6mL
2	标准单位品	0.3mL×6管	8	显色剂B液	6mL
3	20倍溶缩干洗液	25mL	9	中止液	6mL
4	样板做好稀释工作液	6mL	10	描述书	1份
5	特殊化配制液	6mL	11	封板膜	2张
6	酶标微生物培养基	6mL	12	密封性袋	1个

微信备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：320、160、80、40、20、10ng/L.

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒应该而未出具的微生物培养基和设备】

1、37℃恒温恒湿箱

2、标规模酶标仪

3、精密加工移液器及以此性吸头

4、蒸溜水

5、每次性试管

6、吸水性纸

【兔良性肿瘤萎缩成分α（TNF-α）Elisa实验试剂盒进行步数】

1、準備：从微波炉拆下化学制剂盒，高温复温平衡性3020分钟。

2、配液：用减压生理盐水将20倍浓缩造成干洗液溶解成原倍的干洗液。

3、加标准规范品和待测样品：取充裕规模的酶标包被板，固定不变于整体布局完成后上，各自安装基准品孔、待测样本量孔和一片空白参考孔，記錄各孔地位，在基准品孔里添加入基准品50μL；待测样板孔中先参与待测样板10μL，加上样版掺水液40μL（即范例兑水5倍）；乱码参考孔不用。

4、温育：37℃水浴锅或常温箱温育30min。

5、洗板：弃去固态，吸湿A4纸拍干，每孔打满干洗液，静置1min，甩去洗滌液，吸潮纸里拍干，愈来愈去重复洗板4次（也也可以洗板机按规格书怎么写书使用洗板）。

6、加酶标运转的液：每孔放入酶标运转的液50μL，空白页对比孔要加。

7、温育：37℃水浴锅或恒湿箱温育30min。

8、洗板：弃去液體，吸湿紙上拍干，每孔加注洗洁液，静置1min，甩去干洗液，吸水能力从纸拍干，远比相似洗板4次（也快速可用洗板机按表明书操作方法洗板）。

9、显色：每孔先成为显色剂A 液50μL，加个入显色剂B液 50μL，平板电脑混匀器混匀30s（或用力轻松振动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、撤销：拿出来酶标板，每孔加撤销液50μL，解除不良反应（背景色由深蓝色立转土黄色）。

11、测试：以空页孔调零，在撤销后15分钟左右内，用450nm光波长测试各孔的吸光值（OD值）。

12、算起：基于条件品的氨水质量溶液质量浓度及相关联的OD值，运算出条件的身材曲线的条直线复出方程组组，再基于样件的OD值，在复出方程组组上运算出相关联的样件氨水质量溶液质量浓度，也就可以施用各种类型技术应用电脑软件来运算。zui终氨水质量溶液质量浓度为现实的核查氨水质量溶液质量浓度乘上掺水因数。

【兔良性肿瘤烂掉指数α（TNF-α）Elisa微生物培养基盒样版特殊要求】

1、模板不能含叠氮钠（NaN₃），因叠氮钠（NaN₃）是辣根过脱色物酶（HRP）的调节剂。

2、标本收集收集后提早实施提炼，提炼按关于论文实施，提炼后肩负着快实施实验性。若可以即时耐压，可将动物标本放于-20℃手机截图，但应解决致使反复冻融。

3、样品应充沛离心式，严禁有溶血及颗粒状。

【兔肺部肿瘤萎缩指数α（TNF-α）Elisa微生物培养基盒提前准备项目】

1、进行实验报告非常严格采用反映书的运作实行，进行实验报告后果界定必需以酶标仪读数起算。

2、酶标包被板开口后如未用完，应即刻装进去封严袋里添加粗糙剂同步保存。

3、改进措施大部分的细则品、范例和空白一片较都做双份检侧，取平均的值，以降低测试测量误差。

4、铭记样表现在已经直接稀释就可以5倍，换算結果乘于5也是子样本其实氧化还原电位。

5、本微生物培养基盒定量分析依据为10-320ng/L，高于此使用范围，为规则斜率延展计算方式得到的，不为你的最精准按量但是，要用特殊的配制液配制后分析最精准但是（10-320ng/L时间范围内），乖以总溶解稀释7的倍数当以子样本zui终含量。

6、若显色过浅，可适宜缩短底物温育事件。

7、为预防交叠环境污染，标准规定品、范例和空白图片相较比较每加同一个就可以换掉一回吸头；酶标上班液、样版溶解液和底物等公开多组分，要悬臂加样，不得当会遇到微小孔；只能重新在使用封板膜。

8、生化采血管盒存放期内运行，不一批号的生化采血管不恰混用。

9、底物B对光强烈，以防长時间表露于光下。

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒操作程序总结】

安排化学试剂，样品英文和规定品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分种内读OD值

计算

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒测试区间】

10ng/L – 320ng/L

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【兔肿瘤坏死因子α（TNF-α）Elisa试剂盒有效期】

6个月时间