猪甲状腺素（T4）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

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 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

猪甲状腺素（T4）定量分析检查测量化学制剂盒（ELISA）

动用说书

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒试剂盒名称】

猪甲状腺素（T4）定量分析加测实验试剂盒（ELISA）

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒试剂盒不同的用途】

化学发光法判断猪血清、血浆及各种相关全自动范本中甲状腺素（T4）的含量。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒检测原理图】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被猪甲状腺素（T4）单克隆抗体阳性乳白色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，后加入酶标上班液，温育已经可以周期后，洗條删去未相结合的的成分。顺次注入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化反应物酶（HRP）促使下生成为红色代谢物，在酸的功效下转变为黄白色，颜色的深浅与样品中猪甲状腺素（T4）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中猪甲状腺素（T4）含量。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒试剂盒主成】

微信备注：标准规定品（1号→6号）溶度按顺序为：32、16、8、4、2、1 pmol/L.

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒要而未能提供的实验试剂和仪器设备】

1、37℃常温箱

2、基准型号规格酶标仪

3、精密制造移液器及次性吸头

4、萃取水

5、第一次性注射器试管

6、吸附纸

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒操作步骤】

1、做准备：从洗衣机卸下来制剂盒，在常温复温失衡30min。

2、配液：用蒸溜水将20倍果汁清洗液配制成原倍的清洗液。

3、加规则品和待测样例：取任何数目的酶标包被板，调整于架构上，区分安装标准单位化品孔、待测子样本孔和空缺比对孔，记下各孔所在位置，在标准单位化品孔里添加入标准单位化品50μL；待测模板孔中先参与待测模板10μL，再加上模板稀释溶液液40μL（即样表摇匀5倍）；空白图片比较孔不添加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去夜体，吸附A4纸拍干，每孔完成洗條液，静置1min，甩去洗衣液，吸附一张纸拍干，这样再次洗板4次（也能够用洗板机按表示书运行洗板）。

6、加酶标做运作液：每孔建立酶标做运作液50μL，空缺差表孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质液体，容易吸水A4纸拍干，每孔写满洗衣机清洗液，静置1min，甩去洗涤剂液，吸潮书本上拍干，这般连续洗板4次（也可以洗板机按表示书操作步骤洗板）。

9、显色：每孔先引入显色剂A 液50μL，另加入显色剂B液 50μL，板式混匀器混匀30s（或用力悄悄自激振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、中断：拿出酶标板，每孔加中止液50μL，中断体现（茶汤颜色由橙色立转黑色）。

11、测试：以留白孔调零，在结束后151分钟内，用450nm主波长检测的各孔的吸光值（OD值）。

12、统计：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒样本要求】

1、样表不能含叠氮钠（NaN₃），这是由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、组织切片数据采集后赶快去获取，获取按关于论文资料去，获取后肩负着快去科学试验装置。若不可能立马试验装置，可将生物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒注意事项】

1、研究按严格按表明书的运营实施，研究最终鉴定一定以酶标仪读数是以。

2、酶标包被板开启后如未用完，应之后装进密闭袋中放烘干剂保留。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、一定要记住模本逐渐就稀释5倍，计算出来报告单相乘5才称得上范例现实有机废气浓度。

5、本化学制剂盒按量范围之内为1-32pmol/L，可超过此时间范围，为的标准身材曲线扩展换算所有，不当作精确度酶联免疫法最终，试着特殊的兑水液兑水后校正精确度最终（1-32pmol/L规模内），乘上总调制4的倍数当以样表zui终氧化还原电位。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为尽量不要交叉的情况造成的污染，标准单位品、样品和空缺比对每加一家必须根换多次吸头；酶标运作液、子样本做好稀释工作液和底物等公益性多组分，要悬臂加样，不可以刮到细孔；不可以连续操作封板膜。

8、采血管盒存放期内使用的，多种批号的采血管不容许混用。

9、底物B对光比较敏感，防止长时期显示于光下。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒操作程序总结】

备考免疫试剂，印刷品和标准化品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒查重规模】

1pmol/L - 32pmol/L

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【猪甲状腺素（T4）Elisa试剂盒有效期】

6个月