猪内毒素（ET）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

上海J9九游中国实业有限公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售Sigma、America 、等多个国外。
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 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

猪内内毒素（ET）参考值测量微生物培养基盒（ELISA）

的使用使用方法

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒试剂盒名称】

猪内黑色素（ET）参考值探测化学试剂盒（ELISA）

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒试剂盒用处】

降钙素原论文检测论文检测猪血清、血浆及对应液滴样版中内毒性（ET）的含量。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒检测操作过程】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被猪内毒物（ET）单克隆免疫抗体透明化酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，另加入酶标操作液，温育充足期限后，洗衣机清洗祛除未搭配的成分表。顺序加盟底物A、B，底物（TMB）在辣根过被氮化合物酶（HRP）促使下转换为紫色副产物，在酸的反应下转为黄颜色，颜色的深浅与样品中猪内内毒素（ET）含量呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中猪内内毒素（ET）含量。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒试剂盒结构】

备注栏：标准的品（1号→6号）溶液浓度顺序为：1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0312 EU/mL.

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒必须 而未展示的实验试剂和用品】

1、37℃恒温恒湿箱

2、标准单位尺寸规格酶标仪

3、精密五金移液器及一场性吸头

4、蒸溜水

5、一遍性试管

6、容易吸水纸

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒操作步骤】

1、开始准备：从家用冰箱拿出来实验试剂盒，在常温复温稳定性30分。

2、配液：用水蒸气蒸溜水将20倍高浓洗條液配制成原倍的洗條液。

3、加的标准品和待测样例：取十分次数的酶标包被板，固定住于结构上，对应设计规则规定品孔、待测样品孔和空白处对比孔，记录好各孔地段，在规则规定品孔里加入规则规定品50μL；待测样品孔中先入驻待测样品10μL，再加上样表直接稀释就可以液40μL（即样品直接稀释就可以5倍）；没字对应孔没有加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去粘液，储水A4纸拍干，每孔加够干洗液，静置1min，甩去干洗液，吸潮白纸拍干，是这样的重叠洗板4次（也可以洗板机按表示书进行操作洗板）。

6、加酶标操作液：每孔引入酶标操作液50μL，空缺较孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去固体，吸潮纸里拍干，每孔打满洗洁液，静置1min，甩去干洗液，容易吸水书本上拍干，那么反复重复洗板4次（也能作洗板机按讲解书实操洗板）。

9、显色：每孔先参与显色剂A 液50μL，另加入显色剂B液 50μL，平板等混匀器混匀30s（或拿手悄悄股票震荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、撤消：拆下酶标板，每孔加终结液50μL，解除症状（顏色由橙色立转黄绿色）。

11、校正：以没字孔调零，在中断后15分钟的时间内，用450nm光的波长在测量各孔的吸光值（OD值）。

12、来计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒样本要求】

1、样表不能含叠氮钠（NaN₃），是因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、生物标本搜集后及早去取出，取出按相应的论文资料去，取出后肩负着快去科学实验。若不允许实时试验装置，可将生物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒注意事项】

1、调查报告严格要求是以使用说明书怎么写书的操控实施，调查报告结杲鉴定务必以酶标仪读数起算。

2、酶标包被板开启后如未用完，应立马置入密封隔绝袋内加缺水剂同步保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、记住样本量都稀释溶液5倍，计算的结果乖以5究竟范本现实情况氧浓度。

5、本微生物培养基盒定量分析依据为0.0312-1 EU/mL，超出此原则，为原则线条延升测算得出，不当作更准参考值效果，请使用特俗就稀释溶液液就稀释溶液后分析更准效果（0.0312-1 EU/mL范畴内），乘于总掺水度数就是样品zui终密度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为解决交叉重合被污染的，条件品、样例和空白图片照表每加另一个就让换掉多次吸头；酶标工做液、样品溶解稀释液和底物等公共服务酚类化合物，要悬臂加样，应当碰着微孔板；不可多次选择封板膜。

8、化学实验试剂盒保鲜期内选用，各个批号的化学实验试剂不恰混用。

9、底物B对光敏感性，应对长时显示于光下。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒操作程序总结】

备好生化试剂，试品和原则品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒检验面积】

0.0312 EU/mL - 1 EU/mL

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【猪内毒素（ET）Elisa试剂盒有效期】

6个月