鱼皮质醇（Cortisol）定量检测试剂盒（ELISA）

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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

鱼真皮醇（Cortisol）化学发光法测试实验试剂盒（ELISA）

运行解释书

【化学试剂盒名字】

鱼质感醇（Cortisol）降钙素原检测监测制剂盒（ELISA）

【试剂盒功用】

定量分析验测鱼血清、血浆及有关的溶剂样本量中皮革醇（Cortisol）的分子量。

【检测远离】

本免疫细胞试剂盒选取双抗原第二步夹心酶联免疫细胞吸附物法（ELISA）。将细则品、待测样例加进到优先包被鱼真皮醇（Cortisol）单克隆抵抗能力无色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，加个入酶标作业液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过腐蚀物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的用途下化为淡黄色，颜色的深浅与样品中鱼皮料醇（Cortisol）浓度呈正相关的，450nm主波长下旋光度的测定OD值，利用规格品和图纸的OD值，测算样例中鱼皮艺醇（Cortisol）水平。

【试剂盒组成了】

微信备注名：准则品（1号→6号）含量逐一为：2000、1000、500、250、125、62.5 ng/L

【需求而未能提供的采血管和用具】

1、37℃衡温箱

2、原则规格型号酶标仪

3、紧密移液器及一起性吸头

4、分馏水

5、做次性试管

6、吸湿纸

【操作步骤】

1、做好准备：从雾化器卸下来实验试剂盒，在常温复温平横3015分钟。

2、配液：用减压纯净水将20倍浓缩咖啡清洗液摇匀成原倍的清洗液。

3、加要求品和待测范例：取够了用户的酶标包被板，固定好于体系结构上，分为布置规范品孔、待测样品孔和空白一片照表孔，记载各孔座位，在规范品孔里加入规范品50μL；待测模本孔中先放入待测模本10μL，加个模本做好稀释工作液40μL（即样品就稀释5倍）；空白一片参考孔不加以。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去固态，吸附紙上拍干，每孔写满干洗液，静置1min，甩去干洗液，吸水能力白纸拍干，是这样反复重复洗板4次（也能用洗板机按表示书运行洗板）。

6、加酶标任务液：每孔入驻酶标任务液50μL，空页参考孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去夜体，吸附A4纸拍干，每孔完成洗條液，静置1min，甩去干洗液，吸附从纸拍干，这样的重新洗板4次（也需用洗板机按反映书进行操作洗板）。

9、显色：每孔先参加显色剂A 液50μL，再加上入显色剂B液 50μL，平板手机混匀器混匀30s（或手摸缓缓的谐振混匀30s），37℃避光显色15min。

10、终结：取掉酶标板，每孔加暂停液50μL，中止表现（本色由蓝色的立转黄绿色）。

11、测定方法：以空白一片孔调零，在中断后15min内，用450nm可见光波长估测各孔的吸光值（OD值）。

12、来计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【范本的要求】

1、模本不能含叠氮钠（NaN₃），这是因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本收采收采后赶快使用转化成，转化成按相关联资料使用，转化成后肩负着快使用实验操作。若没法即时实验，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、实践方法苛刻按说明怎么写书的方法参与，实践方法最后确定有必要以酶标仪读数是以。

2、酶标包被板打开使用后如未用完，应立刻放到封好袋里加空气干燥剂储存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、记住模板已配制5倍，计算出成果乘上5才能是模本合理有机废气浓度。

5、本化学制剂盒化学发光法範圍为62.5-2000ng/L，高于此范围图，为规范曲线美连通折算所得税率，不当作明确度化学发光法最终后果，一定要用非常规调制溶解液调制溶解后测定法明确度最终后果（62.5-2000ng/L范围之内内），乘于总稀释溶解陪数就是模板zui终酸度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为预防交错危害，标准规定品、样表和白页较每加其中一个马上拆换一次性吸头；酶标操作液、范例做好稀释工作液和底物等服务性多组分，要悬臂加样，应当遇上微孔过滤；不能重覆运行封板膜。

8、化学生化试剂盒保鲜期内操作，有差异 批号的化学生化试剂不允许混用。

9、底物B对光皮肤敏感，防范长时长显示于光下。

【操作程序总结】

预备实验试剂，原辅料和标准单位品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【检验超范围】

62.5ng/L - 2000ng/L

【规格】

96人份/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月