马免疫球蛋白E（IgE）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

马免役球血清E（IgE）一定量查重化学制剂盒（ELISA）

的使用详细使用说明

【化学药品盒品牌】

马免疫检测球核蛋白E（IgE）化学发光法加测免疫试剂盒（ELISA）

【试剂盒贷款用途】

一定量查测马血清、血浆及有关的全自动样本量中抗体球血清E（IgE）的含锌量。

【检测关键技术】

本实验试剂盒采用了双抗原三步夹心酶联免役吸附性法（ELISA）。将规范标准品、待测样表建立到及时包被马免疫性球核蛋白E（IgE）单克隆抗原乳白色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，另加入酶标业务液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过空气氮化合物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的用处下改为黄绿色，颜色的深浅与样品中马免疫细胞球核蛋白E（IgE）浓度呈正涉及，450nm光谱下测量OD值，通过基准品和印刷品的OD值，换算子样本中马免疫性球血清E（IgE）含水量。

【试剂盒组合成】

自己的名字：细则品（1号→6号）渗透压按序为：320、160、80、40、20、10 μg/mL.

【需用而未带来的制剂和用具】

1、37℃温控箱

2、规范规模酶标仪

3、精密加工移液器及一下性吸头

4、分馏水

5、一些性试管

6、吸湿纸

【操作步骤】

1、开始准备：从冷藏柜弄出来微生物培养基盒，环境温度复温和平3020分钟。

2、配液：用水蒸气生理盐水将20倍精提干洗液配制成原倍的干洗液。

3、加标准单位品和待测子样本：取够次数的酶标包被板，调整于骨架上，区别设施规则化品孔、待测模板孔和空页照表孔，記錄各孔地段，在规则化品孔里加入规则化品50μL；待测样板孔中先倒入待测样板10μL，再加上样版掺水液40μL（即范例稀释溶解5倍）；空白一片较孔不带。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液态，储水从纸拍干，每孔加完洗衣机清洗液，静置1min，甩去清洗液，储水书本上拍干，这样一来去重复洗板4次（也能用的 洗板机按使用手册书操作方法洗板）。

6、加酶标事业液：每孔申请加入酶标事业液50μL，乱码照表孔不用。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质，吸潮紙上拍干，每孔完成洗滌液，静置1min，甩去洗洁液，吸水能力纸中拍干，尽管去重复洗板4次（也能用洗板机按解释书进行洗板）。

9、显色：每孔先下载显色剂A 液50μL，加个入显色剂B液 50μL，平面混匀器混匀30s（或拿手悄悄地振动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、中止：拆下酶标板，每孔加解除液50μL，撤消不起作用（顏色由淡蓝色立转黄绿色）。

11、测定法：以空白的孔调零，在撤销后1520分钟内，用450nm光的波长衡量各孔的吸光值（OD值）。

12、运算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【样版耍求】

1、范本不能含叠氮钠（NaN₃），如果叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、生物标本采集程序后更好地参与拆分，拆分按相关内容医学文献参与，拆分后肩负着快参与实验所。若不允许实时校正，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、测试严厉假设按照描述书的工作实行，测试导致辨别须得以酶标仪读数为基准。

2、酶标包被板打开后如未用完，应完毕放到密封盖袋内加干澡剂永久保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、不忘初心模板早就稀释液5倍，计算出来结果显示乖以5便是范本现实密度。

5、本化学试剂盒化学发光法范围之内为10-320μg/mL，已超此区间，为原则曲线图拓宽统计得出，不当作精确度按量最终最终，那可以用个性化就就稀释液就就稀释后核查精确度最终最终（10-320μg/mL标准内），乖以总溶解7的倍数仅以子样本zui终质量浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为避免出现双向废弃物，基准品、样表和空白图片比对每加一款 马上替换一些吸头；酶标运作液、样板就稀释液和底物等通用酚类化合物，要悬臂加样，禁止碰见微孔板；不得已多次的使用封板膜。

8、实验化学制剂盒保证期期内利用，有所不同批号的实验化学制剂禁止混用。

9、底物B对光敏感脆弱，避开长期限裸漏于光下。

【操作程序总结】

安排免疫试剂，合格品和规范品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【探测范畴】

  10μg/mL - 320μg/mL

【规格】

48人份/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月