马免疫球蛋白A（IgA）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

马免役球核蛋白A（IgA）按量检查化学制剂盒（ELISA）

用到说书

【试剂盒名称】

马天然免疫球淀粉酶A（IgA）参考值判断化学药品盒（ELISA）

【试剂盒功用】

酶联免疫法在线检测马血清、血浆及涉及夜体样板中免疫性球蛋清A（IgA）的含量。

【检测作用】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被马免疫力球球蛋白A（IgA）单克隆免疫抗体透明图片酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，多加入酶标任务液，温育充裕时段后，清洗消除未运用的材料。分别参加底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化的物酶（HRP）催化剂的作用下还原成为天蓝色货物，在酸的用下转变成呈黄色，颜色的深浅与样品中马抗体球球蛋白A（IgA）质量浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中马天然丙种球蛋白酶A（IgA）含量。

【试剂盒主成】

微信备注：标准规范品（1号→6号）密度顺次为：120、60、30、15、7.5、3.75 μg/mL.

【是需要而未可以提供的化学药品和仪器】

1、37℃恒温性比较好箱

2、标产品规格酶标仪

3、精密铸造移液器及两次性吸头

4、水蒸气蒸溜水

5、次性试管

6、吸湿纸

【操作步骤】

1、提前准备：从冰箱冷藏取下免疫试剂盒，室内温度复温平横30分钟的时间。

2、配液：用分馏水将20倍原谅我真的喝醉了 因为我真的想你的 一不小心 我知道这样不应该 对你泰国依赖 洗衣液稀释液成原倍的洗衣液。

3、加规定品和待测模本：取充裕用量的酶标包被板，比较固定于架构图上，依次设备条件品孔、待测模板孔和空页照表孔，记下各孔具体位置，在条件品孔内加入条件品50μL；待测模本孔中先融入待测模本10μL，再加上范本稀释液液40μL（即样品希释5倍）；空白的对应孔没加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去夜体，容易吸水A4纸拍干，每孔点满洗條液，静置1min，甩去洗衣液，吸水性紙上拍干，这么连续洗板4次（也能够用洗板机按解释书工作洗板）。

6、加酶标运作液：每孔倒入酶标运作液50μL，留白剖析孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去液态体，吸潮A4纸拍干，每孔加注洗衣机清洗液，静置1min，甩去洗滌液，吸水性纸里拍干，一样多次洗板4次（也可以用洗板机按情况产品说明操作流程洗板）。

9、显色：每孔先假如显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，uv混匀器混匀30s（或拿手悄悄的自激振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、撤消：拿出酶标板，每孔加中断液50μL，撤销反映（有颜色由深蓝色立转黄绿色）。

11、核查：以空白处孔调零，在撤销后15秒钟内，用450nm光谱校正各孔的吸光值（OD值）。

12、算起：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【模本规定】

1、子样本不能含叠氮钠（NaN₃），担心叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本采集程序采集程序后赶紧参与导入，导入按相应参考文献参与，导入后尽义务快参与调查。若不即刻实验室检测，可将生物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、实践认真明确表明书的操作方法做好，实践的结果评判必要以酶标仪读数应写。

2、酶标包被板打开后如未用完，应马上放进密封袋中放吹干剂永久保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、记住样板早已经调制5倍，计算出导致乘于5做到样版实际的浓硫酸浓度。

5、本采血管盒化学发光法范围内为3.75-120μg/mL，不超此范围之内，为要求等值线延申计算出得出，不算作更准降钙素原检测报告单，请说出唯一性扑灭液扑灭后法测定更准报告单（3.75-120μg/mL使用范围内），相乘总稀释液因数就是样本量zui终酸度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为尽量不要交差严重污染，标准单位品、样例和空白图片比每加一种就让更換次吸头；酶标工作上液、模本稀释溶液液和底物等公众酚类化合物，要悬臂加样，不许遇到微孔过滤；禁止相似利用封板膜。

8、化学免疫试剂盒保存期期内的使用，不同的批号的化学免疫试剂不容许混用。

9、底物B对光太敏感，以免长精力显示于光下。

【操作程序总结】

备好制剂，图纸和标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【检则时间范围】

3.75μg/mL - 120μg/mL

【规格】

96T/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月