大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

大鼠神经细胞结构指数kb多巴胺受体纯化指数配体（RANKL）定量分析探测制剂盒

（ELISA）采用原因分析书

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒试剂盒名称】

大鼠癌细胞成分kb肾上腺素受体活性细胞因子配体（RANKL）化学发光法检侧制剂盒（ELISA）

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒试剂盒作用】

酶联免疫法验测大鼠血清、血浆及有关系液状体样版中受损细胞结构指数公式kb感觉碱化系数配体（RANKL）的含量。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒检测道理】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠神经元核要素kb多巴胺受体滋养成分配体（RANKL）单克隆表面抗原透亮酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，后加入酶标运作液，温育足够时后，清洗去掉未融合的化学物质。先后顺序入驻底物A、B，底物（TMB）在辣根过硫化物酶（HRP）催化氧化下转为为绿色化合物，在酸的意义下就变成黄色的，颜色的深浅与样品中大鼠细胞核系数kb蛋白激酶活性细胞配体（RANKL）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠受损细胞质因素kb多巴胺受体纯化成分配体（RANKL）含量。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒试剂盒构成】

提示：细则品（1号→6号）溶度从左到右为：600、300、150、75、37.5、18.75pmol/L

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒所需而未给予的微生物培养基和专业设备】

1、37℃恒温器箱

2、规范型号酶标仪

3、紧密移液器及单次性吸头

4、水蒸气纯水

5、做次性试管

6、吸附纸

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒操作步骤】

1、备好：从电冰箱取出来微生物培养基盒，室内温度复温平横30分鐘。

2、配液：用分馏水将20倍精浓洗洁液溶解成原倍的洗洁液。

3、加规范品和待测样品：取有足够用户的酶标包被板，加固于的框架上，分别是软件设置规定品孔、待测子样本孔和空白的较孔，计录各孔职位，在规定品孔里加入规定品50μL；待测模板孔中先加如待测模板10μL，再加上样本量扑灭液40μL（即范本配制5倍）；一片空白照表孔不带。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去粘液，吸湿白纸拍干，每孔加完洗衣液，静置1min，甩去洗衣机清洗液，储水紙上拍干，这样一来反复洗板4次（也可以用洗板机按原因分析书方法洗板）。

6、加酶标事情液：每孔加盟酶标事情液50μL，乱码比孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去气体，吸水性A4纸拍干，每孔满箱洗涤剂液，静置1min，甩去干洗液，吸水能力一张纸拍干，愈来愈从复洗板4次（也能用的 洗板机按阐述书运作洗板）。

9、显色：每孔先加进显色剂A 液50μL，多加入显色剂B液 50μL，扁平混匀器混匀30s（或用力猛地谐振混匀30s），37℃避光显色15min。

10、停止：拆下酶标板，每孔加解除液50μL，撤消症状（颜色搭配由蓝立转浅黄色）。

11、检测法：以没字孔调零，在终结后15半小时内，用450nm可见光波长精确测量各孔的吸光值（OD值）。

12、测算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒样本要求】

1、范例不能含叠氮钠（NaN₃），为了叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、组织切片收集后提前展开取出，取出按涉及到的学术论文展开，取出后尽义务快展开实验操作。若没法立马试验检测，可将标本采集放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒注意事项】

1、工作设计严苛明确描述书的实际操作采取，工作设计的结果鉴定需要以酶标仪读数为标准。

2、酶标包被板清晨雨后如未用完，应之后置入密封性袋里加太干剂留存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、一定要记住子样本就已扑灭5倍，统计最后乘上5才行子样本具体情况酸度。

5、本化学药品盒按量范围之内为18.75-600pmol/L，不低于此范畴，为细则线条交叉计算的所述，不被称为精确度降钙素原检测但是，要用特殊性兑水液兑水后测量精确度但是（18.75-600pmol/L区域内），乘于总就稀释质数和合数即是样表zui终含量。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为不要双向废弃物，标淮品、范例和留白對照每加同一个就会更換以此吸头；酶标事业液、模板稀释溶液液和底物等服务性酚类化合物，要悬臂加样，严禁遇到微孔板；不可以反复应用封板膜。

8、免疫化学药品盒保鲜期内用到，有所不同批号的免疫化学药品没法混用。

9、底物B对光灵敏，防止长时光暴露自己于光下。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒操作程序总结】

做好准备微生物培养基，合格品和标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒查重依据】

18.75pmol/L - 600pmol/L

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【大鼠细胞核因子kb受体活化因子配体（RANKL）Elisa试剂盒有效期】

6个