人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）定量检测试剂盒使用说明书

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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人磷硝化作用腺苷酸碱化蛋白酶激酶（AMPK）化学发光法探测生化试剂盒（ELISA）

利用讲解书

【人磷硝化作用腺苷酸滋养蛋清激酶（AMPK）Elisa化学实验试剂盒化学实验试剂盒公司名称】

人磷酸性反应腺苷酸碱化球蛋白激酶（AMPK）一定量探测制剂盒（ELISA）

【人磷硝化作用腺苷酸活性蛋白质激酶（AMPK）Elisa试剂盒试剂盒使用】

定量分析在线检测人血清、血浆及重要性溶剂样版中磷酸性反应腺苷酸纯化蛋清激酶（AMPK）的浓度。

【人磷酸性反应腺苷酸滋养淀粉酶激酶（AMPK）Elisa试剂盒检测机理】

本微生物培养基盒用于双免疫系统抗体第二步夹心酶联免疫系统活性炭吸附法（ELISA）。将规则品、待测范例引入到及时包被同学磷酸性反应腺苷酸滋养蛋白质激酶（AMPK）单克隆抗体的全透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，加上入酶标工作上液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氮化合物物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的使用下变身浅黄色，颜色的深浅与样品中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）浓度呈正关于，450nm光的波长下测量OD值，结合标准品和原辅料的OD值，计算方式模板中人磷硝化作用腺苷酸碱化蛋白质激酶（AMPK）纯度。

【人磷过酸腺苷酸碱化血清激酶（AMPK）Elisa试剂盒试剂盒形成】

备注名称：标准化品（1号→6号）溶液浓度先后顺序为：200、100、50、25、12.5、6.25 U/L

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒需求而未给予的化学试剂和用具】

1、37℃衡温箱

2、规定年纪酶标仪

3、精密机械移液器及一遍性吸头

4、水蒸气蒸溜水

5、每次性试管

6、吸湿纸

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒操作步骤】

1、需备：从冷库拿掉微生物培养基盒，温度复温平横30钟头。

2、配液：用分馏水将20倍浸提洗滌液稀释液成原倍的洗滌液。

3、加细则品和待测样表：取已经可以总数量的酶标包被板，固定不变于知识体系上，各是如何设置准则品孔、待测范例孔和空页较孔，记录查询各孔具体位置，在准则品孔内加入准则品50μL；待测模本孔中先添加待测模本10μL，再加上子样本掺水液40μL（即样品扑灭5倍）；空白一片比较孔没有。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去粘液，吸水能力纸中拍干，每孔加完洗條液，静置1min，甩去清洗液，吸水能力从纸拍干，尽管按顺序洗板4次（也能用洗板机按这使用说明书操控洗板）。

6、加酶标任务液：每孔入驻酶标任务液50μL，空白图片相较比较孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质液体，吸附一张纸拍干，每孔满油洗滌液，静置1min，甩去清洗液，储水白纸拍干，既然如此从复洗板4次（也都可以洗板机按表示书方法洗板）。

9、显色：每孔先加进显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，扁平混匀器混匀30s（或用力轻抚波动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、解除：拿出来酶标板，每孔加终结液50μL，撤销发生反应（色彩由淡蓝色立转黄白色）。

11、核查：以留白孔调零，在停止后15半个小时内，用450nm吸光度测试各孔的吸光值（OD值）。

12、算出：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒样本要求】

1、模板不能含叠氮钠（NaN₃），由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、疟原虫采样后提早来通过抽取，抽取按相关资料来通过，抽取后需承担快来通过实验设计。若不许马上检验，可将样本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒注意事项】

1、调查从严采用描述书的实现实现，调查报告单辨别有必要以酶标仪读数准确。

2、酶标包被板打开使用后如未用完，应再次放入填料密封袋添加皮肤干燥剂存放。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、劳记模本已然稀释溶液5倍，计算出结杲乘于5该是范本真实质量浓度。

5、本实验试剂盒降钙素原检测区域为6.25-200 U/L，可超过此範圍，为标准的的曲线延展算起所得税，不为你的较准度酶联免疫法毕竟，一定要用个性化做好溶解工作液做好溶解工作后旋光度的测定较准度毕竟（6.25-200 U/L範圍内），相乘总直接稀释就可以陪数即是模板zui终浓度值。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为逃避交错式污染破坏，标准化品、模本和空缺较每加这个还要拆卸一些吸头；酶标上班液、样品调制液和底物等公共服务混合物，要悬臂加样，允许见到微小孔；不准抄袭选用封板膜。

8、制剂盒保存期期内食用，多种批号的制剂不宜混用。

9、底物B对光刺激性，避免出现长时段曝光于光下。

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒操作程序总结】

预备化学制剂，产品的样品和原则品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒验测范畴】

  6.25 U/L - 200 U/L

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）Elisa试剂盒有效期】

6个月