人20-HETE定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人20-HETE酶联免疫法检查测量化学制剂盒（ELISA）

用介绍书

【人20-HETEElisa化学药品盒化学药品盒分类】

人20-HETE酶联免疫法在线检测免疫试剂盒（ELISA）

【人20-HETEElisa试剂盒试剂盒不同的用途】

参考值查重人血清、血浆及涉及到的全自动样表中20-HETE的纯度。

【人20-HETEElisa试剂盒检测方法】

本化学制剂盒选取双免疫力抗体三步夹心酶联免疫力吸附剂法（ELISA）。将标品、待测样例下载到要预先包自己20-HETE单克隆抗体阳性透明色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，后加入酶标运转液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过空气非金属氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的用下化为茶色，颜色的深浅与样品中人20-HETE浓度呈正关联，450nm主波长下测定法OD值，据标准的品和原辅料的OD值，计算样版中人20-HETE含锌量。

【人20-HETEElisa试剂盒试剂盒根据】

提示：标准品（1号→6号）密度按顺序为：1600、800、400、200、100、50 pg/mL.

【人20-HETEElisa试剂盒要求而未带来了的实验试剂和设施】

1、37℃控温箱

2、标准单位规格参数酶标仪

3、紧密移液器及有一次性地吸头

4、水蒸气纯净水

5、一回性试管

6、储水纸

【人20-HETEElisa试剂盒操作步骤】

1、的准备：从冷库存入制剂盒，高温复温稳定30分种。

2、配液：用萃取水将20倍浓缩造成洗洁液希释成原倍的洗洁液。

3、加条件品和待测样板：取十分人数的酶标包被板，固定好于层次结构上，分辨設置标淮单位品孔、待测模本孔和乱码对比孔，数据各孔的位置，在标淮单位品孔内加入标淮单位品50μL；待测样品孔中先注入待测样品10μL，多加样板摇匀液40μL（即模本扑灭5倍）；没字对比孔不添加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液态体，吸潮纸中拍干，每孔完成洗洁液，静置1min，甩去干洗液，吸水性白纸拍干，是这样重覆洗板4次（也可以洗板机按表示书进行操作洗板）。

6、加酶标操作液：每孔引入酶标操作液50μL，空白处参考孔不放。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质，吸潮书本上拍干，每孔加完洗滌液，静置1min，甩去清洗液，吸水能力从纸拍干，太过多次洗板4次（也常用洗板机按详细产品说明书操作使用洗板）。

9、显色：每孔先建立显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，安卓平板混匀器混匀30s（或拿手用适当的力度轻轻振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、结束：去除酶标板，每孔加中止液50μL，终结反應（红颜色由颜色立转黄颜色）。

11、检验：以乱码孔调零，在中断后15半小时内，用450nm光波波长侧量各孔的吸光值（OD值）。

12、折算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【人20-HETEElisa试剂盒样本要求】

1、样板不能含叠氮钠（NaN₃），因叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、组织切片收集后早日开展提现，提现按相应学术论文开展，提现后应要快开展實驗。若不能够之后应力测试，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【人20-HETEElisa试剂盒注意事项】

1、实验操作设计严格规范，并按照阐述书的运行开始，实验操作设计最终结果辨认不得不以酶标仪读数为标准。

2、酶标包被板打开后后如未用完，应马上装进去封好袋里加烘干剂存为。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、谨记子样本就已经稀释液5倍，估算没想到相乘5才能是样版实际上的浓硫酸浓度。

5、本采血管盒参考值条件为50-1600pg/mL，小于此区间，为标准的线条延申运算所有，不为你的精确化学发光法效果，若要唯一性溶解液溶解后旋光度的测定精确效果（50-1600pg/mL空间内），相乘总摇匀质数和合数就是样表zui终浓度值。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为以免 是交叉空气污染，细则品、范例和空缺参考每加一种就可以拆换一个吸头；酶标做工作液、样本量直接稀释就可以液和底物等公共服务酚类化合物，要悬臂加样，不应碰倒微孔过滤；不恰从复用到封板膜。

8、微生物培养基盒保存期期内在使用，差异批号的微生物培养基不允许混用。

9、底物B对光特别敏感，规避长时泄露于光下。

【人20-HETEElisa试剂盒操作程序总结】

准备好制剂，打样定制和的标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【人20-HETEElisa试剂盒论文检测范畴】

50pg/mL - 1600pg/mL

【人20-HETEElisa试剂盒规格】

96人份/盒

【人20-HETEElisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【人20-HETEElisa试剂盒有效期】

6个月左右

上海J9九游中国实业有限公司主要从事实验室设备，免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销售。并代理销售多个国外，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供*的科研试剂和完善的技术服务。咨询
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