人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

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人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）降钙素原检测检侧微生物培养基盒（ELISA）

在使用阐述书

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒试剂盒名称】

人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）按量查测生化试剂盒（ELISA）

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒试剂盒用处】

参考值检验人血清、血浆及有关固态模板中8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的含碳量。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒检测方法】

本化学试剂盒主要采用双免疫力抗体2步夹心酶联免疫力吸收法（ELISA）。将原则品、待测样例参加到事先包别人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）单克隆表面抗原透明色酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，后加入酶标操作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过阳极金属氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的帮助下变得呈黄色，颜色的深浅与样品中人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）浓度呈正有关，450nm可见光波长下核查OD值，可根据规则品和备样的OD值，测算样本量中人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）份量。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒试剂盒分解成】

微信备注名：规定品（1号→6号）含量由小到大为：320、160、80、40、20、10 pg/mL

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒必须要而未供应的实验试剂和仪器】

1、37℃控温箱

2、要求规模酶标仪

3、精密加工移液器及一次性注射器性吸头

4、水蒸气蒸溜水

5、一遍性试管

6、吸水性纸

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒操作步骤】

1、注意：从冰箱保鲜取掉微生物培养基盒，恒温复温失衡30半个小时。

2、配液：用分馏水将20倍溶缩洗衣机清洗液兑水成原倍的洗衣机清洗液。

3、加规范标准品和待测样版：取充裕数据的酶标包被板，稳固于框架的上，分别是使用规范基准品孔、待测模板孔和没字参考孔，见证各孔方位，在规范基准品孔中放入规范基准品50μL；待测样品孔中先填加待测样品10μL，再加上样本量兑水液40μL（即样板溶解稀释5倍）；空白的参考孔不加以。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液，吸水能力纸里拍干，每孔点满洗洁液，静置1min，甩去洗衣机清洗液，吸湿紙上拍干，这样的相似洗板4次（也要用洗板机按说明怎么写书工作洗板）。

6、加酶标本职岗位液：每孔引入酶标本职岗位液50μL，留白较孔没有。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去粘液，储水书本上拍干，每孔加注洗條液，静置1min，甩去洗條液，吸附从纸拍干，都是这样反复洗板4次（也都可以洗板机按描述书操作的洗板）。

9、显色：每孔先建立显色剂A 液50μL，再加上入显色剂B液 50μL，iPad混匀器混匀30s（或用力轻轻地股票震荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、中断：取下酶标板，每孔加终结液50μL，解除影响（本色由颜色立转紫色）。

11、法测：以空白处孔调零，在停止后15钟头内，用450nm主波长预估各孔的吸光值（OD值）。

12、确定：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒样本要求】

1、样例不能含叠氮钠（NaN₃），是由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、动物标本采集工具后抓紧时间参与提炼，提炼按相应的期刊论文参与，提炼后承当快参与实验性。若并不能直接实验室检测，可将样本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒注意事项】

1、试验使用要严格遵照表明书的使用展开，试验使用效果辨别务必以酶标仪读数是以。

2、酶标包被板开启后如未用完，应之后存放在密封性能袋里添加皮肤干燥剂保存图片。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、一定要记住样例都已经 稀释溶液5倍，折算毕竟×5做到样板实计氧化还原电位。

5、本免疫试剂盒降钙素原检测条件为10-320pg/mL，已超此位置，为规范曲线拟合伸延计算出个人所得，不当成最精准降钙素原检测效果，请说出层次性摇匀液摇匀后核查最精准效果（10-320pg/mL的范围内），乘上总摇匀4的倍数仅以子样本zui终溶液浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为逃避对称环境破坏，标准规范品、样例和白页对应每加这个还要根换每次吸头；酶标事情液、模板调制液和底物等公用类物质，要悬臂加样，不允许遇上微孔板；不能重新施用封板膜。

8、制剂盒保鲜期内施用，有差异批号的制剂不恰混用。

9、底物B对光太敏感，防止久段显示于光下。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒操作程序总结】

安排采血管，样品管理和规则品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒检查区域】

10pg/mL - 320pg/mL

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【人8羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）Elisa试剂盒有效期】

6个月