人5-脂氧合酶（5-LOX）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人5-脂氧合酶（5-LOX）降钙素原检测探测化学试剂盒（ELISA）

采用详细使用手册

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒试剂盒名称】

人5-脂氧合酶（5-LOX）参考值检则制剂盒（ELISA）

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒试剂盒功能】

定量分析检测工具人血清、血浆及相关联液状体样版中5-脂氧合酶（5-LOX）的含量。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒检测的工作原理】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被人5-脂氧合酶（5-LOX）单克隆表面抗原乳白色酶标包被板中，温育至少时候后，洗條擦掉未通过的成份，加上入酶标运作液，温育有足够耗时后，清洗洗除未运用的的成分。从左到右下载底物A、B，底物（TMB）在辣根过被铁的氧化物酶（HRP）离子液体下转变为淡蓝色物品，在酸的帮助下化为土黄色，彩色的浓淡与样机中人5-脂氧合酶（5-LOX）渗透压呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人5-脂氧合酶（5-LOX）含量。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒试剂盒组合成】

备注名称：标淮品（1号→6号）氧化还原电位由大到为：480、240、120、60、30、15 U/L.

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒要而未展示 的化学药品和设备】

1、37℃恒溫箱

2、标准规定规格型号酶标仪

3、精密五金移液器及一些性吸头

4、减压纯水

5、有一次性地试管

6、吸潮纸

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒操作步骤】

1、开始准备：从冰箱冷藏卸下来生化试剂盒，制冷复温动平衡30钟头。

2、配液：用水蒸气生理盐水将20倍浓缩液洗條液配制成原倍的洗條液。

3、加要求品和待测范本：取至少次数的酶标包被板，调整于骨架上，区分快速设置标淮品孔、待测子样本孔和空白图片对比孔，计录各孔角度，在标淮品孔里添加入标淮品50μL；待测范例孔中先倒入待测范例10μL，加上模板兑水液40μL（即样板配制5倍）；一片空白剖析孔没加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去粘液，吸水能力一张纸拍干，每孔点满洗滌液，静置1min，甩去洗滌液，吸湿纸中拍干，这样的多次洗板4次（也可以用洗板机按阐明书运营洗板）。

6、加酶标办公液：每孔倒入酶标办公液50μL，空白的相较比较孔没加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去溶剂，储水书本上拍干，每孔加完清洗液，静置1min，甩去洗衣液，吸水能力一张纸拍干，尽管相同洗板4次（也适用洗板机按阐述书进行操作洗板）。

9、显色：每孔先假如显色剂A 液50μL，加个入显色剂B液 50μL，小米平板电脑混匀器混匀30s（或用力轻柔的谐振混匀30s），37℃避光显色15min。

10、暂停：抽出酶标板，每孔加中止液50μL，撤消生理反应（颜色搭配由暗蓝色立转黄颜色）。

11、测量：以空页孔调零，在暂停后15几分钟内，用450nm光谱侧量各孔的吸光值（OD值）。

12、算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒样本要求】

1、范本不能含叠氮钠（NaN₃），如果叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本录入录入后更好地实行转化成，转化成按有关参考文献实行，转化成后需承担快实行研究。若不能够当即实验室检测，可将疟原虫放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒注意事项】

1、工作报告非常严格依照规定说书的运行使用，工作报告成果辨别必要以酶标仪读数起算。

2、酶标包被板开口后如未用完，应直接装到密闭袋内加粗糙剂上传。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、谨记模板以及溶解5倍，折算报告乘上5便是范本现场溶度。

5、本化学试剂盒化学发光法范畴为15-480U/L，以上此区间，为规则线性伸延求算偶然所得，不当作为准的一定量报告单，那可以用特殊化摇匀液摇匀后校正为准的报告单（15-480U/L使用范围内），减去总稀释溶解公因数成为样品zui终浓度值。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为逃避交错式空气污染，规定品、样品和一片空白对应每加某个就会进行更换单次吸头；酶标事业液、模本掺水液和底物等服务性类物质，要悬臂加样，不恰碰上细孔；不许反复操作封板膜。

8、化学药品盒保存期期内在使用，有所差异批号的化学药品不许混用。

9、底物B对光敏感性，防范长时刻显示于光下。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒操作程序总结】

準備生化试剂，原材料和标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒检查范围之内】

15U/L - 480U/L

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【人5-脂氧合酶（5-LOX）Elisa试剂盒有效期】

6个月