犬卵巢癌抗原（CA125）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

【操作步骤】

1、筹备 ：从冰箱保鲜拿掉化学试剂盒，常温复温均衡性3030分钟。

2、配液：用分馏水将20倍浓缩提炼洗衣液溶解稀释成原倍的洗衣液。

3、加标准单位品和待测样板：取足够用量的酶标包被板，统一于层次结构上，区分软件设置标淮规范品孔、待测范本孔和空白处比孔，记下各孔地位，在标淮规范品孔添加入标淮规范品50μL；待测样板孔中先注入待测样板10μL，后加样本量扑灭液40μL（即样例溶解5倍）；空白的比孔不带。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去流体，吸水性A4纸拍干，每孔写满干洗液，静置1min，甩去干洗液，储水书本上拍干，这般去重复洗板4次（也能用的 洗板机按就产品说明书操作流程洗板）。

6、加酶标事业液：每孔成为酶标事业液50μL，空白的比孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去透明液体，容易吸水书本上拍干，每孔完成干洗液，静置1min，甩去干洗液，吸水能力白纸拍干，即使抄袭洗板4次（也快速可用洗板机按证明书方法洗板）。

9、显色：每孔先成为显色剂A 液50μL，另加入显色剂B液 50μL，安卓平板混匀器混匀30s（或用手掌轻柔的之间上下混匀30s），37℃避光显色15min。

10、解除：取掉酶标板，每孔加撤消液50μL，结束不起作用（色调由浅蓝色立转成黄色）。

11、测量：以空白页孔调零，在撤销后15分钟的英文内，用450nm激发光谱在测量各孔的吸光值（OD值）。

12、统计：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【子样本耍求】

1、样表不能含叠氮钠（NaN₃），会因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本数据采集数据采集后赶快使用获取，获取按对应专著使用，获取后需承担快使用实验英文。若不要实时试验装置，可将动物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、调查报告苛刻安装阐明书的运营展开，调查报告最后判别必要以酶标仪读数为标准。

2、酶标包被板开口后如未用完，应完毕存入封密袋里添加干澡剂留存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、记住子样本早就就稀释5倍，来计算报告乘于5算得范本具体情况盐浓度。

5、本免疫试剂盒定量分析条件为0.5-16U/mL，多于此领域，为标准单位申请这类卡种曲线提额延展换算所述，不当作最精确性参考值没想到，那可以用特定摇匀液摇匀后检测最精确性没想到（0.5-16U/mL区域内），×总配制公因数即是样品zui终溶度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为杜绝交叉性感染，条件品、样品和没字剖析每加其中一个就让调整一下吸头；酶标本职工作液、范本稀释溶液液和底物等公共信息成分，要悬臂加样，应当碰倒细孔；允许相似选择封板膜。

8、化学免疫试剂盒质保期内选用，其他批号的化学免疫试剂不可以混用。

9、底物B对光的敏感，规避长时期裸漏于光下。

【操作程序总结】

安排采血管，试品和规范标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【测试领域】

0.5U/mL - 16U/mL

【规格】

48T/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月