犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）elisa试剂盒说明书

注：规定品（1号→6号）含量逐一为：320、160、80、40、20、10 μg/L.

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒要有而未给出的实验试剂和仪器】

1、37℃常温箱

2、标准规定产品规格酶标仪

3、细密移液器及一遍性吸头

4、水蒸气纯水

5、一个性试管

6、容易吸水纸

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒操作步骤】

1、做好准备：从保鲜柜取出来制剂盒，环境温度复温取舍30分鐘。

2、配液：用蒸溜水将20倍浓缩提炼洗洁液溶解成原倍的洗洁液。

3、加准则品和待测子样本：取足够使用量的酶标包被板，固定好于结构框架上，区分制定细则品孔、待测样品孔和空白图片照表孔，記錄各孔座位，在细则品孔添加入细则品50μL；待测子样表孔中先添加待测子样表10μL，加上样本量希释液40μL（即样品做好稀释工作5倍）；没字照表孔要加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液，吸湿一张纸拍干，每孔加注清洗液，静置1min，甩去洗洁液，吸水能力纸中拍干，一样相似洗板4次（也用于洗板机按证明书使用洗板）。

6、加酶标工做液：每孔加盟酶标工做液50μL，空白图片照表孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去药液，吸附A4纸拍干，每孔点满洗洁液，静置1min，甩去洗涤剂液，吸水性纸中拍干，这样的重覆洗板4次（也常用洗板机按说明怎么写书操作使用洗板）。

9、显色：每孔先入驻显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，平板电脑混匀器混匀30s（或用力轻柔地振动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、中断：拿出酶标板，每孔加终结液50μL，中止反應（字体颜色由绿色立转呈黄色）。

11、判断：以空白的孔调零，在停止后15分钟的英文内，用450nm吸光度侧量各孔的吸光值（OD值）。

12、折算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒样本要求】

1、样版不能含叠氮钠（NaN₃），是由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、动物标本录入后应及早使用分离出，分离出按对应期刊论文使用，分离出后需承担快使用实践。若不可立刻耐压试验，可将标本采集放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒注意事项】

1、测试所严格要求依据介绍书的操作步骤来进行，测试所的结果评判不得不以酶标仪读数时以。

2、酶标包被板清晨雨后如未用完，应即刻置入密闭袋里加皮肤干燥剂维持。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、劳记模板现在已经兑水5倍，计算最终×5才行样板具体情况酸度。

5、本化学制剂盒按量领域为10-320μg/L，已超此超范围，为标曲线方程扩宽估算所述，不为精确参考值结局，那可以用特异溶解直接稀释就可以液溶解直接稀释就可以后旋光度的测定精确结局（10-320μg/L範圍内），乖以总配制4的倍数成为范本zui终渗透压。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为逃避交差生态破坏，规格品、范例和留白差表每加同一个需要调整做次吸头；酶标运转液、样表直接稀释就可以液和底物等公益性混合物，要悬臂加样，应当碰倒微孔过滤；不准再次选用封板膜。

8、化学制剂盒存放期内运行，区别批号的化学制剂不恰混用。

9、底物B对光太敏感，避免出现长时段显示于光下。

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒操作程序总结】

开始准备制剂，样件和条件品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒在线检测条件】

10μg/L - 320μg/L

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【犬基质金属蛋白酶2（MMP-2）Elisa试剂盒有效期】

6个月