大鼠弓形虫IgG抗体定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

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大鼠弓形虫IgG抵抗能力酶联免疫法加测微生物培养基盒（ELISA）

利用解释书

【试剂盒名称】

大鼠弓形虫IgG抗体阳性按量检验化学试剂盒（ELISA）

【试剂盒应用场景】

按量检则大鼠血清、血浆及相关内容溶剂样版中弓形虫IgG表面抗原的含量。

【检测原里】

本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠弓形虫IgG抗原透明度酶标包被板中，温育充足時间后，洗衣机清洗消去未结合实际的组成成分，加上入酶标工作上液，温育有足够时期后，洗條洗去未通过的物质。顺次添加底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化的物酶（HRP）崔化下转换为淡蓝色产品，在酸的的功效下变得黄色的，字体颜色的深有与样本中大鼠弓形虫IgG免疫抗体氧浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠弓形虫IgG免疫抗体含量。

【试剂盒根据】

提示：标准的品（1号→6号）有机废气浓度由小到大为：16、8、4、2、1、0.5 U/L.

【要求而未带来了的实验试剂和专业设备】

1、37℃衡温箱

2、规范标准规格参数酶标仪

3、精密仪器移液器及两次性吸头

4、减压生理盐水

5、第纸质试管

6、吸附纸

【操作步骤】

1、开始准备：从冷库去除免疫试剂盒，制冷复温动态平衡30几分钟。

2、配液：用减压纯净水将20倍精炼洗衣机清洗液调制成原倍的洗衣机清洗液。

3、加规范标准品和待测样版：取非常总数量的酶标包被板，确定于架构图上，依次放置细则的品孔、待测样表孔和空白页对应孔，信息各孔地址，在细则的品孔添加入细则的品50μL；待测模本孔中先成为待测模本10μL，多加范例溶解稀释液40μL（即模本调制5倍）；乱码照表孔不放。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液體，吸湿纸中拍干，每孔加够洗滌液，静置1min，甩去洗衣液，吸水性A4纸拍干，这么重新洗板4次（也也可以洗板机按讲解书操作流程洗板）。

6、加酶标任务液：每孔假如酶标任务液50μL，空白一片参考孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去全自动，吸附A4纸拍干，每孔点满洗條液，静置1min，甩去洗衣机清洗液，吸潮紙上拍干，太过重复使用洗板4次（也常用洗板机按证明书运作洗板）。

9、显色：每孔先注入显色剂A 液50μL，加个入显色剂B液 50μL，平板电脑混匀器混匀30s（或手去慢慢振动混匀30s），37℃避光显色15min。

10、暂停：拆下酶标板，每孔加撤销液50μL，停止的反应（茶汤颜色由绿色立转黄颜色）。

11、判断：以空白图片孔调零，在暂停后15多分钟内，用450nm光谱校正各孔的吸光值（OD值）。

12、计算公式：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【样例追求】

1、样品不能含叠氮钠（NaN₃），正因为叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、标本数据采集数据采集后早日来生成，生成按重要性学术论文来，生成后尽义务快来实验英文。若未能可以现场实验，可将生物标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、试验苛刻安装使用指南怎么写书的作业实施，试验可是分辨必要以酶标仪读数算起。

2、酶标包被板开封市后如未用完，应立马存放在封闭袋里添加干涩剂保护。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、不忘初心模本早已溶解5倍，核算的结果乖以5才称得上模本实际上的氧化还原电位。

5、本化学药品盒按量范围之内为0.5-16U/L，已经超过此範圍，为条件的身材曲线伸延核算得出，不算作更准降钙素原检测最后，请你特殊化配制液配制后法测更准最后（0.5-16U/L规模内），×总稀释溶解3的倍数就是指样表zui终质量浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为杜绝平行造成的污染，标准规范品、范本和空页相较比较每加另一个总要更換以此吸头；酶标工做液、样本量摇匀液和底物等公用设施成分，要悬臂加样，不可会遇到细孔；不得当反复重复应用封板膜。

8、化学免疫试剂盒存放期内的使用，与众不同批号的化学免疫试剂不得当混用。

9、底物B对光的敏感，制止长时期曝光于光下。

【操作程序总结】

备好微生物培养基，样品管理和原则品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【检查测量依据】

0.5U/L - 16U/L

【规格】

96人份/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月时间