牛钙调素依赖性蛋白激酶2（CAMK 2）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

【试剂盒构成的】

提示：规范品（1号→6号）渗透压顺次为：32、16、8、4、2、1 μg/L.

【要求而未带来了的采血管和器具】

1、37℃常温箱

2、标准产品规格酶标仪

3、五金机械移液器及一起性吸头

4、减压生理盐水

5、一回性试管

6、容易吸水纸

【操作步骤】

1、预备：从微波炉拿出微生物培养基盒，在常温复温平衡点30一分钟。

2、配液：用水蒸气纯水将20倍原谅我真的喝醉了 因为我真的想你的 一不小心 我知道这样不应该 对你泰国依赖 干洗液配制成原倍的干洗液。

3、加规则品和待测范本：取任何用户的酶标包被板，固定住于框架结构上，分开设立条件规范品孔、待测样表孔和空页比对孔，备案各孔位址，在条件规范品孔内加入条件规范品50μL；待测样品孔中先倒入待测样品10μL，另加样表稀释液液40μL（即样版稀释溶解5倍）；空白的比孔没有加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去溶剂，吸水性白纸拍干，每孔加够洗條液，静置1min，甩去洗衣机清洗液，储水书本上拍干，这般抄袭洗板4次（也可以选择洗板机按说明怎么写书操作流程洗板）。

6、加酶标办公液：每孔倒入酶标办公液50μL，一片空白对比孔要加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去介质，储水一张纸拍干，每孔完成洗滌液，静置1min，甩去洗洁液，吸水能力从纸拍干，这样重叠洗板4次（也常用洗板机按说明怎么写书操作使用洗板）。

9、显色：每孔先成为显色剂A 液50μL，再加上入显色剂B液 50μL，安卓平板混匀器混匀30s（或拿手悄悄阻尼振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、撤消：拿掉酶标板，每孔加终结液50μL，中止症状（本色由海蓝立转土黄色）。

11、旋光度的测定：以留白孔调零，在中断后1530分钟内，用450nm光波波长检测的各孔的吸光值（OD值）。

12、换算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【模板要】

1、模本不能含叠氮钠（NaN₃），是由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、组织切片抓取后更快地做去除，去除按对应论文参考文献做，去除后尽义务快做检测。若不即刻经过多次实验发现，可将组织切片放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、科学试验严厉，并按照说明怎么写书的操作流程做好，科学试验然而判别必要以酶标仪读数算起。

2、酶标包被板打开使用后如未用完，应可以倒入良好的密封性袋添加变干剂保持。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、谨记样本量已是直接稀释就可以5倍，估算报告单乖以5这才是样例实际上的有机废气浓度。

5、本化学试剂盒参考值超范围为1-32μg/L，以上此空间，为规范标准线性延展计算的所得税率，不算作精确一定量没想到，请说出特俗调制液调制后法测定精确没想到（1-32μg/L空间内），减去总稀释溶解质数和合数既为范本zui终氧化还原电位。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为制止交叉性生态破坏，的标准品、样版和空页对应每加一款 就换个以此吸头；酶标事业液、样本量扑灭液和底物等共同类物质，要悬臂加样，禁止刮到细孔；不得已去重复食用封板膜。

8、实验化学药品盒保质期内应用，其他批号的实验化学药品不得不混用。

9、底物B对光敏感脆弱，预防长时候泄露于光下。

【操作程序总结】

做好准备免疫试剂，原辅料和标准单位品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【检测工具超范围】

1μg/L - 32μg/L

【规格】

96人份/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月