马免疫球蛋白A（IgA）Elisa试剂盒说明书

【须要而未给予的采血管和设施】

1、37℃恒湿箱

2、标准化的规格酶标仪

3、精密机械移液器及单次性吸头

4、减压蒸溜水

5、单次性试管

6、容易吸水纸

【操作步骤】

1、安排：从冷藏柜抽出制剂盒，室内温度复温稳定性30一分钟。

2、配液：用萃取水将20倍溶缩清洗剂液就稀释成原倍的清洗剂液。

3、加准则品和待测样例：取十分量的酶标包被板，一定于结构框架上，都配置规范规格品孔、待测样表孔和空白的较孔，见证各孔地方，在规范规格品孔添加入规范规格品50μL；待测模板孔中先加入到待测模板10μL，加个样版兑水液40μL（即样例溶解5倍）；留白差表孔没有。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去气体，吸水性纸里拍干，每孔加够洗條液，静置1min，甩去洗滌液，吸附白纸拍干，这些重复使用洗板4次（也需用洗板机按阐述书控制洗板）。

6、加酶标运行液：每孔注入酶标运行液50μL，没字对比孔不添加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去液态物质，储水A4纸拍干，每孔油满洗滌液，静置1min，甩去干洗液，吸水性纸里拍干，这般反复重复洗板4次（也可以使用洗板机按原因分析书进行洗板）。

9、显色：每孔先加盟显色剂A 液50μL，另加入显色剂B液 50μL，平板手机混匀器混匀30s（或拿手轻抚股票震荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、中断：掏出酶标板，每孔加结束液50μL，中断生理反应（配色由海蓝立转紫色）。

11、校正：以白页孔调零，在结束后1530分钟内，用450nm光的波长估测各孔的吸光值（OD值）。

12、统计：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【子样本想要】

1、范例不能含叠氮钠（NaN₃），为了叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、生物标本取出后早日实现取出，取出按有关于专著实现，取出后承当快实现实验性。若不允许完毕现场实验，可将样本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【注意事项】

1、实验设计设计要严可以依照情况产品说明的基本操作来，实验设计设计结论直接判断必要以酶标仪读数是以。

2、酶标包被板打开使用后如未用完，应及时安装密封性能袋内加粗糙剂留存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、一定要记住样版早已调制5倍，算没想到乘于5这才是样品现实情况盐浓度。

5、本制剂盒参考值规模为3.75-120μg/mL，超过了此依据，为基准身材曲线蔓延计算方式得出，不当成确切酶联免疫法效果，要用特色掺水溶解液掺水溶解后检验确切效果（3.75-120μg/mL时间范围内），乖以总摇匀7的倍数仅以样板zui终氧浓度。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为逃避交错污染问题，标淮品、样板和空白的对应每加某个就需要换个一些吸头；酶标岗位液、样品调制液和底物等公共性类物质，要悬臂加样，不得已碰倒纳米纤维；不准重叠利用封板膜。

8、化学化学试剂盒存放期内使用的，有差异 批号的化学化学试剂不宜混用。

9、底物B对光比较敏感，防范长精力体现于光下。

【操作程序总结】

需备化学制剂，原材料和规范标准品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【检则标准】

3.75μg/mL - 120μg/mL

【规格】

96T/盒

【贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【有效期】

6个月