大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

备注栏：标淮品（1号→6号）溶液浓度分别为：160、80、40、20、10、5 nmol/L.

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒要而未带来的化学制剂和器具】

1、37℃衡温箱

2、的标准外形尺寸酶标仪

3、精密模具移液器及一回性吸头

4、蒸溜水

5、做次性试管

6、吸附纸

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒操作步骤】

1、注意：从冷藏柜卸下来微生物培养基盒，常温复温动态平衡3015分钟。

2、配液：用分馏水将20倍浸提洗衣机清洗液溶解稀释成原倍的洗衣机清洗液。

3、加规格品和待测范例：取非常数的酶标包被板，规定于构架上，各用设置成基准单位品孔、待测范本孔和空缺较孔，记录时间各孔地址，在基准单位品孔里加入基准单位品50μL；待测模板孔中先进入待测模板10μL，多加范例扑灭液40μL（即范本就稀释5倍）；乱码比孔没有。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去介质液体，吸潮纸中拍干，每孔加够洗洁液，静置1min，甩去洗衣液，吸附A4纸拍干，太过反复洗板4次（也都可以洗板机按讲解书操作步骤洗板）。

6、加酶标事情液：每孔参加酶标事情液50μL，空白图片相较比较孔不加以。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去液滴，吸水性书本上拍干，每孔满箱洗衣机清洗液，静置1min，甩去洗滌液，吸湿一张纸拍干，越来越抄袭洗板4次（也适用洗板机按说明怎么写书实操洗板）。

9、显色：每孔先成为显色剂A 液50μL，后加入显色剂B液 50μL，iPad混匀器混匀30s（或手去慢慢阻尼振荡混匀30s），37℃避光显色15min。

10、停止：拿掉酶标板，每孔加中断液50μL，结束表现（颜色搭配由淡蓝色立转黄白色）。

11、旋光度的测定：以白页孔调零，在终结后157分钟内，用450nm光波波长测试各孔的吸光值（OD值）。

12、确定：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒样本要求】

1、样板不能含叠氮钠（NaN₃），这是由于叠氮钠（NaN₃）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2、样本采摘后赶紧去分离出，分离出按涉及到的专著去，分离出后需承担快去进行实验。若可以实时做实验的时候，可将组织切片放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒注意事项】

1、工作设计严要求假设按照代表书的做出操作做出，工作设计结局判别应该以酶标仪读数是以。

2、酶标包被板开口后如未用完，应立刻倒入胶封袋里加干澡剂存有。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。

4、争做合格党员范例早已直接稀释就可以5倍，统计结杲相乘5该是模本具体浓硫酸浓度。

5、本生化试剂盒按量区域为5-160nmol/L，低于此时间范围，为规范标准斜率延展计算出所有，不为你的为准酶联免疫法最终结杲，要用特有做好就稀释工作液做好就稀释工作后核查为准最终结杲（5-160nmol/L区域内），乖以总直接稀释就可以4的倍数既得样例zui终渗透压。

6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。

7、为减少交错空气污染，标准规范品、样板和空白处比每加一家就会改换一些吸头；酶标运作液、样本量稀释液液和底物等服务性成分，要悬臂加样，不得当有遇到纳米纤维；禁止多次重复食用封板膜。

8、化学制剂盒保鲜期内动用，有差异 批号的化学制剂不宜混用。

9、底物B对光灵敏，制止长时刻体现于光下。

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒操作程序总结】

筹备 制剂，检样和标准规范品

加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

加入终止液

15分钟之内读OD值

计算

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒检查范围内】

5nmol/L - 160nmol/L

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒规格】

96人份/盒

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒贮藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【大鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉（DPD）Elisa试剂盒有效期】

6个月